我师姐就是做多糖的，所以我也略知一二。HPLC检测多糖为大分子要用凝胶柱并且有一定的分子量范围，看你要测什么糖了 。紫外可以了，最好是PAD，HPLC不用衍生化，标准品中检所买的很贵。
其他方法：比色法，GC

我师姐就是做多糖的，所以我也略知一二。HPLC检测多糖为大分子要用凝胶柱并且有一定的分子量范围，看你要测什么糖了 。紫外可以了，最好是PAD，HPLC不用衍生化，标准品中检所买的很贵。
其他方法：比色法，GC

不过为什么我看许多文献都讲要对多糖进行衍生化，再者多糖中并不含共轭结构，用紫外的效果会好吗？PAD是什么？

多糖衍生化主要是把OH转为甲基或乙酰基，这样可以进行GC，hplc就不用了。
没有共轭结构但是只要有发色团也可以检测到。PAD是二极管矩阵监测器，也是紫外了，不过可以记录所有波长的吸收，对你选择波长很方便了。  

多糖衍生化主要是把OH转为甲基或乙酰基，这样可以进行GC，hplc就不用了。
没有共轭结构但是只要有发色团也可以检测到。PAD是二极管矩阵监测器，也是紫外了，不过可以记录所有波长的吸收，对你选择波长很方便了。  

你做纯度分析,还是单糖组成分析啊?如果是前者应该用凝胶柱,我用过TSK的,检测器应该用示差检测器,紫外肯定不行,正如你所说多糖没有共轭结构,也没有发色基团,如果你做想用HPLC作单糖组成,建议购买MACHEREY-NAGEL公司的NUCLEOGEL SUGARPb糖分析专用柱，这样多糖水解后可以直接上柱，以水洗脱就可以，一般的7种常见单糖都可以分开，氨基柱有的糖分不开，特别是一些同分异构体

多糖的HPLC检测可以用蒸发光散射检测器或示差折光检测器，首先用液质连用确定一下你的多糖的分子量范围以选择合适的硅胶柱，TSK柱效果不错。

多糖的分析是一个大问题啊！和大家讨论一下吧，经综合各种文献我认为
多糖结构分析内容：要搞清
2.  每个单糖残基的D-、L-构型，吡喃环式或呋喃环式
3.  羟基被取代情况（糖苷键的位置）

1、单糖组成：（对照品：葡萄糖、岩藻糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖）
气相色谱（糖氰乙酸酯衍生物、糖醇乙酸酯）
b：TFA酸解：气相色谱（乙酰化物）
c：甲醇解：气相色谱（三甲基硅醚）

2：高碘酸钠氧化和Smith降解
a：每摩尔己糖基的高碘酸消耗量、甲酸释放量。
（目的：判断可氧化糖基与不可氧化糖基之比例）
b：Smith降解完全水解，气相分析，如有葡萄糖（表示有1-3键糖基）、甘油（有1-6或1-2糖基）、甲酸（有1-6糖基）
Smith降解部分水解，说明主干糖苷键类型。

3：甲基化分析（Hakrmor法）-支链分布
多糖—甲基化—水解—还原得甲基化单糖醇—乙酰化得糖醇衍生物—GC-MS检测。
对照品 2,3,4,6-四甲基葡萄糖 糖苷键类型 1—

a：吡喃环式或呋喃环式

a： 紫外吸收光谱（280、260）
b：电泳（琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺凝胶、醋酸纤维素薄膜）
c：薄层色谱（多糖不水解）
7：X射线衍射，立体构型。

多糖含量测定的方法主要分为以下两大类

一类是利用组成多糖的单糖的缩合反应而建立的方法：
如咔唑－硫酸法、蒽酮-硫酸法、苯酚-硫酸等比色的方法。该法测定时方法学干扰较大，但由于目前国内的实验条件，多糖的含量测定仍主要采用该方法。

另一类则是直接测定多糖本身而建立的方法：
如高效液相色谱法，但该法需要多糖的纯品。采用HPLC
测定糖，选择合适的检测器很重要：
（1）RI检测器具有稳定、易于操作、样品不被破坏等特点，但该法受温度和流动相组成的影响，不能使用梯度洗脱。
（2）uv-vis检测器：因为糖只在近紫外区190nm有吸收，流动相和样品中的杂质会影响多糖检测的灵敏度。若采用柱前衍生或柱后衍生反应，生成具有强紫外吸收的物质，可大大提高灵敏度。
（3)ELSD方法可解决上述问题，可与梯度洗脱相容，已有研究者应用HPLC-ELSD直接测定二糖海藻糖及D-木糖等单糖，但多糖的含量测定还未见报道。

多糖的纯度测定方法主要有：比旋度法、超离心法、高压电泳法、凝胶过滤法、纸层析法、冻融法、光谱扫描法

乳糖酸用液相选用什么流动相呀 ？

实际上上面提到的PAD并不是什么二级阵列管
其作用原理为：单糖或寡糖在碱性条件下电离，通过阴离子柱分离，然后用脉冲检测器检测，可用于单糖或寡糖的定性和定量

我觉得还是用示差检测器比较好，另外你要首先确定你的多糖的分子量范围，然后选择合适的凝胶柱，即可。

选用过完膜的水做流动相
根据分子量分布选择合适的凝胶柱和
视差检测器（多糖本身无吸收）
后来标准品用水做流动相走

Shodex KS-802使用纯水作洗脱液，也可以添加最大20％的极性有机溶剂，对于是否耐盐，一时找不到说明书了，不过见过用10mM NaCl的。  

粗多糖的测定方法(1)
分子量大于10，000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后，加入碱性铜试剂，选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖，沉淀部分与苯酚-H2SO4反应，生成有色物质，在485nm条件下，有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。
参照AOAC方法。适用于检测含有分子量大于10，000道尔顿葡聚糖的样品。
除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
（4） 铜应用溶液：取铜贮存液50 ml，加水50 ml混匀后加入无水硫酸钠12.5 g，临用新配。
（7） 20 g/L苯酚溶液：称取2.0g苯酚，加水溶解并稀释至100ml，混匀备用。
（8） 葡聚糖标准液：称取500mg葡聚糖（分子量500,000D）于称量皿中，105℃干燥4h至恒重，置于装有干燥硅胶的干燥器中冷却。准确称取100mg干燥后的葡聚糖，用水定容至100ml，葡聚糖标准浓度为1.0 mg/ml。
（9） 葡聚糖标准应用液：吸取葡聚糖标准液10ml，用水稀释10倍，葡聚糖终浓度为0.1mg/ml。
粗多糖的测定方法(2)

（1） 样品提取：称取样品1～5g，加水100ml，沸水浴加热2h，冷却至室温，定容至200ml （V1），混匀后过滤，弃初滤液，收集余下滤液。
（2） 沉淀高分子物质：准确吸取上述滤液100ml （V2），置于烧杯中，加热浓缩至10ml，冷却后，加入无水乙醇40ml，将溶液转至离心管中以3000rpm离心5min，弃上清液，残渣用80%乙醇洗涤3次，残渣供沉淀葡聚糖之用。
（3） 沉淀葡聚糖：上述残渣用水溶解，并定容至50ml （V3），混匀后过滤，弃初始滤液后，取滤液2.0ml （V4），加入2.5mol/L NaOH 2.0ml，Cu应用溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2mim，冷却后以3000rpm离心5min，弃上清液，残渣用洗涤液洗涤3次，残渣供测定葡聚糖之用。
（4） 测定葡聚糖：上述残渣用2.0mL 1.8mol/L H2SO4溶解，用水定容至100mL（V5）。准确吸取2.0ml（V6），置于25ml比色管中，加入1.0ml苯酚溶液，10ml浓硫酸，沸水浴煮沸2分钟，冷却比色。从标准曲线上查得相应含量，计算粗多糖含量。
5.2 标准曲线制备：
精密吸取葡聚糖标准应用液0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00，1.50，2.00ml（分别相当于葡聚糖0.01，0.02，0.04，0.06，0.08，0.10，0.15，0.20mg），补充水至2.0mL，加入苯酚溶液1.0ml，浓硫酸10ml，混匀，沸水浴2分钟，混匀，沸水浴2分钟，冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比，测定吸光度值（A），以葡聚糖浓度为横坐标，A为纵坐标绘制标准曲线。
从标准曲线上查得样品相应含量，计算粗多糖含量。

公式中：c--从标准曲线上查得样品测定管中葡聚糖含量，mg；
V1--样品提取时定容体积，ml；
V2--沉淀高分子物质取液量，ml；
V3 --沉淀葡聚糖时定容量，ml；
V4 --沉淀葡聚糖时取液量，ml；
V5 --测定葡聚糖时定容体积，ml；
V6 --样品比色管中取样液体积，ml；
m--样品称量质量，g；
（1） 苯酚-H2SO4溶液可以和多种糖类进行显色反应，常用于总糖的测定。所以测定过程中应注意容器及试剂中其他糖类的干扰。
（2） 苯酚-H2SO4溶液和不同类的糖反应，显色的强度略有不同，反映在标准曲线的斜率不同。如果已知样品中糖的结构，应尽量以同类糖的纯品做标准品，或以含有已知浓度的同类产品做对照品进行检测分析；如果样品中糖的类型未知或结构多样，则只能以葡萄糖计或其他糖计报告结果。
（3） 试验证明葡萄糖、果糖等单糖，蔗糖、乳糖等双糖、低聚糖--棉子糖，淀粉、糊精等多糖及甜味剂糖精不干扰粗多糖测定。
（4） 本方法由北京市卫生防疫站建立，经中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所验证。

以上是我找到的方法，希望对大家有所帮助  

传统的多糖提取方法是水提醇沉原料在90-95℃的水浴条件下溶解多糖等水溶性成分，过滤，滤液浓缩至一定体积后，利用多糖溶于水而不溶于醇的特点，将多糖沉淀出来。有文献报道，对于多糖，酸提取可将多糖含量提高。但有人经过比较，用酸提取方法得到的多糖含量与水提醇沉方法无明显差别，且操作烦琐，因此，目前较多采用水提醇沉提取多糖。
水提醇沉所获得的多糖常含有较多的游离蛋白及植物色素，为了使多糖精品具有较好的色泽和较高的给药安全性，应经过脱色和去蛋白的步骤对多糖进行精制。曾有人使用活性炭、大孔树脂及双氧水等方法进行脱色处理，但都未达到理想结果。说明多糖具有高度不均一性和复杂的物理性质，很难用传统化学方法将其纯化、脱色，应考虑采用与以往不同的更有效的方法。
多糖除蛋白多采用Sevege法。以正丁醇：氯仿（1：4）作为萃取液，加入到样品水溶液中振摇。离子法除去形成凝胶状的蛋白质，反复多次直至正丁醇氯仿层不浑浊为止。由于多糖中蛋白质有游离态和结合态两种形式，在进行脱蛋白同时还要考虑与蛋白结合的多糖的情况，因此在考察萃取效率时，还要同时检测多糖含量。
多糖的传统精制方法是使用凝胶色谱和离子交换色谱，利用分子筛效应，所用最小孔径的凝胶柱一般得到多糖纯度可达96%以上，可以大幅度提高精度。但此法对于工业化的大量粗品的精制不太适用。
有报道采用超滤膜技术可以使多糖含量提高，并达到80%以上，还可以通过条件优化和实用性设计，使之适用于工业化生产。该方法的原理是利用膜的选择性，在膜的两侧存在一定的能量差作为推动力，而溶液中各组分凭透过膜迁移速度不同而实现分离。所以，膜分离操作属于速率控制传质过程，具有设备简单、无相变、处理效率高、节能等优点。
多糖的分子量测定是研究多糖性质的一项较为重要的工作。多糖的性质往往与它的分子量大小有关，例如，多糖溶液的粘度不但随浓度的增大而升高，而且与多糖分子量大小有关。一般说来，分子量增大粘度增高。在生物学研究中，发现有些多糖由于分子量大小方面差别，所产生的某些效应有一定差异。
多糖的纯化和分子量测定常用方法有超离心法，高压电泳法，渗透压法，粘度法和光散射法等。目前较好的方法是高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）。该方法具有快速、高分辨和重现性好的优点。
凝胶色谱是一种表征高聚物分子量和分子量分布等特征的物理化学方法，一般称作凝胶渗透色谱（GPC）或体积排阻色谱（SEC）,还有称作凝胶过滤色谱(GFC)和立体排阻色谱（SEC）。其分离原理为分子筛，即按照溶质分子在流动相溶剂中的实际体积大小而分离，较大的分子先流出，较小的分子由于可以渗入填料孔隙中从而较后流出。
由于GPC有着众多优点：操作简单，所需设备简单，分离柱简单处理后即可重复使用，分离效果好，重复性高，样品回收率近100％。特别是迅速发展起来的高效凝胶渗透色谱（HPGPC），有快速、高分辨率、重复性好的显著特点，在多糖和蛋白质等大分子的研究中的运用日益增加。
二 多糖的组成与结构分析
多糖的组成与结构分析主要包括以下几个方面：
1 多糖的单糖组成及其摩尔比；
2 多糖中糖苷键所取的异头碳的连接类型；
3 多糖中的结合蛋白的量及氨基酸种类；
4 多糖中糖基与氨基酸残基的连接方式。
目前应用于多糖的单糖组成研究分析方法主要有薄层色谱法，高效液相色谱法及衍生化气相色谱法等方法，其中衍生化气相色谱法是目前多糖分析中最常用的手段。
无论采用哪一种分析方法，首先都需将多糖完全水解。常用的水解方法有稀硫酸水解和三氟乙酸水解，两种方法水解方法都可以使多糖水解完全。
应用于多糖的单糖组成研究的方法中，薄层色谱法比较简单，但是灵敏度较低，有些含量低的单糖不易检测出来，利用此方法可以初步检测多糖的单糖组成。
由于糖的紫外吸收较弱，因此在用到高效液相色谱法测定多糖的单糖组成时，紫外检测器检测效果不好。可以将样品进行衍生化处理或使用如蒸发光散色检测器等通用型检测器。用高效液相色谱测定单糖的组成，由于各单糖结构相似，峰不易分开，不能达到理想的分离度，这给分析多糖的单糖组成带来一定困难。
目前，多糖的组成分析多采用气相色谱法。由于单糖的挥发性很低，所以在应用气相色谱法对多糖的单糖组成进行分析时，必须首先要进行衍生化处理以增加其挥发性。常用的衍生化处理方法有硅烷化法和乙酰化法。但如果水解后的产物直接进行衍生化处理后即进行气相色谱分析，会存在一种单糖出多重峰的现象。产生这种情况的原因应是单糖的结构存在异构体互变的现象。为了避免多重峰的现象，通常将水解后样品处理成为具有挥发性的糖腈乙酸酯衍生物或是糖醇乙酸酯衍生物。
文献报道多糖主要由葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖组成。其摩尔比根据药材来源不同有所差别，其中葡萄糖的含量基本都在50%以上。