杜氏标记杜氏是什么意思

→ 什么是杜氏病?发病后应该怎样護理?要注意那些问题?

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      你好杜氏病是消化道出血的少见原洇之一。该病最早由法国医师于1897年发现又称为恒径动脉畸形,是由于供血动脉进入粘膜后没有逐渐变细形成毛细血管,仍保持管径不變而突出于管腔内容易破裂,造成消化道出血杜氏病的治疗目前以内镜下治疗为主,包括内镜下喷洒止血药物、粘膜下注射硬化治疗、热凝治疗、金属钛夹治疗、微波治疗、射频消融治疗、OTSC吻合夹治疗等内镜下止血治疗失败者可以选择血管介入栓塞或外科手术治疗。術后注意饮食习惯注意保护胃粘膜等护胃治疗

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salina)为一种无细胞壁的单细胞真核绿藻是迄今为止所发现世界上最耐盐的植物之一,其抗逆力极强能在0.05M—5MNaCl的环境中生存。近年来杜氏盐藻作为生物反应器的研究已经越來越受到重视,但是目前有关杜氏盐藻遗传背景的研究报道较少。 热休克蛋白(hsp)70家族是目前已知的最保守的蛋白家族之一在绿色植物和藻类,不同hsp70基因的编码产物分布在胞浆、叶绿体和线粒体内参与新生蛋白质的正确折叠、转运及其降解,对细胞的生长、分化和各种环境的适应都起着重要作用光和热胁迫均可诱导生成大量的hsp70 mRNA。因此作为诱导表达产物,其hsp70基因启动子已经被用于构建转基因莱茵衣藻表達载体并得到了成功的转化。本研究根据hsp70在各物种间高度保守这一特点克隆得到定位在胞浆的杜氏盐藻hsp70基因组DNA全长以及其两侧调控序列,并初步探讨hsp70 mRNA表达水平以及与光和热诱导的关系为下一步杜氏盐藻表达载体的构建奠定基础。 筛选标记及其合适的启动子是建立杜氏鹽藻遗传转化系统的两个先决条件抗生素抗性基因作为筛选标记基因在微藻类转基因研究中也得到了应用,但是由于密码子的偏爱性引起的基因沉默现象,常常会使抗生素抗性基因不表达或表达效率较低此外,杜氏盐藻对在植物细胞和其他绿藻遗传转化研究中用作筛選标记的大多数抗生素具有天然的抗性这就使筛选转化杜氏盐藻藻株面临更多限制因素。业已发现杜氏盐藻细胞对除草剂极其敏感。除草剂抗性基因(bar)编码的phosphinothricin 基因以来由于其容易筛选、成本低和能被有效控制等优点,bar基因已被广泛 用于转基因植物研究当中然而,迄今為止用bar基因作为筛选标记基因筛选 转化杜氏盐藻的研究尚未见报道另一方面,为了使外源基因得到高水平表达 还必须寻找具有高活性嘚杜氏盐藻内源性启动子。因此本研究分离和鉴定了 在杜氏盐藻中高表达的肌动蛋白基因的5’调节区,构建了一个包含肌动蛋白基 因启動子和bar基因的杜氏盐藻表达载体利用基因枪法转化杜氏盐藻,得到 了对即T具有抗性的杜氏盐藻转化藻株 子DNA序列特异性引物。以杜氏盐藻基因组步行文库DNA为模板分别用基因 特异性引物和衔接头引物进行巢式PCR扩增,产物分别经T载体克隆并测序 5.将诱导时间分成0、15、30、45、60、90囷12Omin6个时间段。光诱导 时杜氏盐藻细胞暗培养17h后迅速转移到光照培养箱中依不同的时间段收获 细胞,光照条件为2.000 2.500 p m01光子mZs一。温度诱导为正瑺温度生长的 藻细胞转移到40℃水浴中而光照条件维持不变,然后在不同的时间收获细胞 框架编码着650个氨基酸的连续多肤。推导的氨基酸序列经Genbank Blast分 析与数据库中胞桨hsp70序列一致与莱茵衣藻、人、小麦和啤酒酵母胞浆hsp70 的序列一致性分别为83%、80%、81.5%和80.5%。编码氨基酸的密码子存在着奣 到一个完整的hsp70基因该基因包括5’和3’侧翼结构序列在内共6812个 核昔酸。2639bp的外显子被8个内含子所分割在推断转录起始点上游245bp 及177处分别有為TATA盒和CC从T结构,两个热休克元件分别位于883bp

【学位授予单位】:郑州大学
【学位授予年份】:2004


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