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1. apoapsis in orbit around the moon
地球近地点( perigee) 远地点(Apogee) 月球近月点 Periselene/Pericynthion/Perilune 远月点 Aposelene/Apocynthion/Apolune 火星近火点 Periareion/Perimartian.
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i请填写生词本名称!apocathery 求翻译啊，多谢_百度知道
apocathery 求翻译啊，多谢
提问者采纳
药剂师；药师；药材商药衡盎司
这段原文是这样的：An apocathery assigned me to watch over you.你看怎么翻译好？不能说是药剂师吧？这算是一个奇幻小说里的。
一位天神委派我来守护你。
额，前文是说这个人受了很重的伤，然后被人带到了一个陌生的地方，他睁眼看到一个人，那个人这么跟他说了一句话
恩，道长或炼丹药师，他可以轻易帮助有道骨的人。
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出门在外也不愁中国生物化学与分子生物学报
Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biol
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文章快速检索
&&中国生物化学与分子生物学报
1999年&15卷&05期
血管内皮生长因子基因治疗大鼠脑缺血的实验研究
刘艳秋,周爱儒,牛大地,朱小君,陈光慧,汤健
为探讨血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗大鼠脑缺血的可行性,构建了pcD2/hVEGF121真核表达质粒,建立持续性大脑中动脉堵塞(MCAO)的局灶性脑梗塞模型,大鼠脑皮质直接注射法转移pcD2/hVEGF121真核表达质粒。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、VEGF免疫组织化学法、脑血管计数及梗塞面积测定等方法检测转移pcD2/hVEGF121真核表达质粒后大鼠脑中VEGF基因表达及生物学效应。结果发现,与转移空载质粒的对照组相比,转移VEGF基因后7d的大鼠脑组织中有VEGFmRNA高表达,VEGF免疫组化染色可见VEGF蛋白表达水平增高,脑血管数增多,梗塞体积缩小。因此,直接注射法转移VEGF基因能够在缺血脑组织中表达,表达产物能够发挥生物学效应,进而起到保护脑组织作用。
中国生物化学与分子生物学报
):&681-686
五步蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA的克隆和序列分析
范春阳,钱友存,杨胜利,龚毅
抽提五步蛇毒腺总RNA,通过反转录PCR(RT-PCR)扩增出五步蛇毒腺中一种低分子量金属蛋白酶(aculysinl)的cDNA,克隆到pGMT-vector并测定了全序列.推导其编码的蛋白质序列,发现aculysinl是以酶原形式合成的分泌蛋白,酶原包括信号肽、前肽、金属蛋白酶成熟肽和间隔肽4个部分.金属蛋白酶成熟肽与其它蛇毒金属蛋白酶相比,蛋白质一级结构具有一定的同源性,有一个保守的Zn2+结合位点:HEXXHXXGXXH.Aculysinl含有6个半胱氨酸,推测形成3对链内二硫键.五步蛇低分子量金属蛋白酶cDNA的克隆,为研究蛇毒金属蛋白酶结构与功能的关系,以及开发治疗血栓药物打下了良好的基础
中国生物化学与分子生物学报
):&687-691
人溶酶体α-甘露糖苷酶cDNA的克隆与表达
孙怀昌,DonaldF.PATERSON,JohnH.WOLFE
溶酶体α-甘露糖苷酶是糖蛋白降解途径的主要外糖苷酶,该酶缺陷引起溶酶体α-甘露糖苷贮积症.用RT-PCR法从HeLa细胞中克隆的人溶酶体α-甘露糖苷酶cDNA含有1个由2964bp组成的阅读框,编码由988个氨基酸组成的多肽,前26个氨基酸为潜在的前导序列,成熟多肽的预测分子量为111kD,具有11个潜在的N-交联糖基化部位.用逆转录病毒介导法导入患者细胞后,该cDNA表达高活性α-甘露糖苷酶.序列分析表明,此cDNA与已发表的拟似人溶酶体α-甘露糖苷酶cDNA有不同程度的差异,尤其是第2315位碱基的T-C转换可能与控制酶活性有关
中国生物化学与分子生物学报
):&692-698
应用绿色荧光蛋白研究外源基因在造血细胞的表达调控
刘兵,周生,张双喜,孙建民,杨靖清,于晓媅,毛宁
以增强型绿色荧光蛋白为报道分子,研究双基因逆转录病毒载体介导小鼠骨髓细胞的基因转移中,SV(simianvirus)40启动子和内部核糖体进入位点(internalribosomeentrysite,IRES)对双基因共表达的影响。构建双基因中间序列分别为SV40启动子和IRES的载体pLESN和pLEIN。经包装获得较高滴度的病毒上清,以共培养的方式感染5-氟尿嘧啶预刺激的小鼠骨髓细胞。流式细胞仪检测表明转染效率约25%,PCR证明EGFP基因整合至骨髓细胞基因组。半固体培养转基因细胞7d,LEIN组获得具有G418抗性的集落中98%表达绿色荧光,而LESN组54%。结果表明:在双基因逆转录病毒载体介导的小鼠骨髓细胞的基因转导中,IRES与内部SV40启动子相比,更能保证双基因的共同表达。
中国生物化学与分子生物学报
):&699-703
转基因小鼠中外源基因部分内含子序列的缺失及其对转录的影响
李鹏,何泉,陈兰英
利用PCR扩增及PCR测序在显微注射法产生的转基因小鼠中发现,整合在小鼠染色体上的肌球蛋白轻链2启动子(myosinlightchain2promoter,MLC2)-糜酶(chymase)外源融合基因存在两种形式,一种为全长的融合基因,另一种在糜酶结构基因的第一内含子中缺失了213bp的序列。RT-PCR结果表明,缺失了部分内含子序列的外源融合基因不能在转基因小鼠心脏中表达.而全长的外源融合基因则能较高水平地表达,竞争性PCR定量实验表明在200ng心脏总RNA反转录产物中约含5.05(±1.38)×106个糜酶cDNA分子。上述结果表明,糜酶结构基因的第一内含子可能对MLC2-糜酶基因的表达具有调控作用。
中国生物化学与分子生物学报
):&704-708
rhM-CSFsR在大肠杆菌中的表达及其配基结合活性分析
罗寿青,郑德先,饶青,刘彦信,马正宇,吴克复
从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)胞外具有结合活性区域的cDNA,经平端连接将其克隆到原核表达载体pET-28a的His-Tag下游,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,重组的人可溶型M-CSFR(rhM-CSFsR)在宿主菌中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的38%.重组蛋白经Ni2+组氨酸结合树脂螯合层析柱纯化,获得了纯化的rhM-CSFsR,经SDS-PAGE显示为单一区带,其表观分子量为34kD.用酶联免疫吸附分析(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)证明rhM-CSFsR有明显的M-CSF专一结合活性,Kd值为7.8nmol/L,只有一个M-CSF结合位点.本实验结果显示原核表达的rhM-CSFsR具有明显的配基结合活性,提示M-CSFR的糖基化程度对于其配基结合活性不是必不可少的,为深入进行rhM-CSFsR的生物学功能及其临床意义的研究打下了良好的基础
中国生物化学与分子生物学报
):&709-713
人钙调素在大肠杆菌中的表达、纯化及其活性研究
李晓军,武建国,郭大文,徐建平,孙海虹
利用基因重组技术,将经PCR扩增获得的人钙调素基因(hCaMcDNA)插入质粒pBV220,构建重组表达载体hCaM/pBV220,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆.阳性重组子在大肠杆菌DH5α中经温度诱导可高效表达CaM蛋白,经15%SDS-PAGE分析,可观察到一与CaM分子量相符(约17kD)的诱导表达条带,其表达量占菌体蛋白总量20%,并主要以可溶性形式表达.Westernblot结果证实,17kD的表达条带可与标准鼠抗人CaM单克隆抗体起特异反应.用Pheny1-SepharoseCL-4B疏水亲和层析法纯化重组菌超声上清表达产物,每1L菌液可获CaM纯品3～4mg.重组人CaM(rhCaM)与牛脑CaM的氨基酸组成基本一致.生物活性测定结果提示,rhCaM具有激活NAD激酶的活性,其激活程度与标准人脑CaM几乎一致.
中国生物化学与分子生物学报
):&714-718
肠毒素性大肠杆菌CS3纤毛抗原在痢疾菌中的表达及其免疫效果研究
韩照中,应天翼,曹勇,芮贤良,张兆山,苏国富,黄翠芬
首先通过体内外重组的方法,构建了福氏2a痢疾菌T32asd基因缺陷的突变体FaD,作为抗原载体菌;同时,构建包含asd基因的表达质粒pYX102,与FaD一起,构成宿主-载体平衡致死系统,用于在没有抗生素条件选择的情况下,稳定表达克隆在表达质粒上的外源抗原基因.将肠毒素性大肠杆菌的CS3菌毛抗原基因克隆至pYX102,构建成重组表达质粒pYX103,ELISA检测结果证实CS3在痢疾菌中可以很好地表达.免疫小鼠后可诱生相应的抗体,虽然口服免疫和注射免疫产生的CS3抗体效价有一定差别,但对痢疾菌的毒株攻击均可提供较好保护.该结果为细菌性腹泻疫苗的研制提供了候选株.
中国生物化学与分子生物学报
):&719-723
人小肠三叶因子在大肠杆菌中的表达
王蔚,口如琴,李令媛,茹炳根
利用PCR技术将人小肠三叶因子(hITF)基因重组入表达载体pGEX-4T-1,构建了融合蛋白GST-hITF的重组表达质粒pGTF,在大肠杆菌中诱导表达。表达的融合蛋白经亲和层析、凝血酶切和凝胶过滤层析得到纯化的hITF蛋白。测定了重组蛋白的氨基酸组成、分子量及其对酸和蛋白酶的抗性。Western印迹表明重组蛋白具有hITF的抗原性,并对大鼠胃溃疡具有明显的预防和保护作用。
中国生物化学与分子生物学报
):&724-728
豌豆核糖体小亚基蛋白S21的cDNA克隆、序列分析及在G2豌豆中的表达研究
刘天昀,国哲峰,朱玉贤
以G2豌豆幼苗为材料,构建了滴度为6.5×106pfu的cDNA文库,用同源序列筛选法从该文库中得到一个全长465bp的cDNA。杂交分析认为它是一完整的cDNA序列。DNA序列分析表明,它拥有一个282bp的开放读码框,编码94个氨基酸。计算机同源序列比较发现,它可能编码豌豆核糖体小亚基蛋白S21(RS21-PEA),因为该序列与已知的玉米、水稻S21在氨基酸全序列水平上有32%～35%的同源性,并含有与RNA结合的特征结构域。进化树分析显示S21蛋白可在一定程度上反映生物的进化及遗传变异趋势。
中国生物化学与分子生物学报
):&729-732
重组抗人活化血小板单链抗体-尿激酶原导向溶栓剂的基因构建及表达
张曼,方巧君,胡美浩
为了获得特异性高的导向溶栓药物,应用PCR技术,得到抗人活化血小板单抗(SZ-51)的Fab′基因片段。再用酶切方法,将Fab′中CH1基因片段替换成合成的连接分子(linker)基因,构建成单链抗体基因,并插入到人尿激酶原分泌肽基因及低分子量单链尿激酶(scu-PA-32k)之间,最终构建成重组抗人活化血小板单链抗体-尿激酶原融合蛋白基因。此融合蛋白基因在昆虫细胞中得到表达。纯化的表达产物SDS-PAGE鉴定,其分子量约为60kD,与预期值相符。其比活为9000IU/mg蛋白。ELISA法初步证明此重组的融合蛋白具有与活化血小板抗原结合特异性。
中国生物化学与分子生物学报
):&733-737
截短型人胰岛素样生长因子-Ⅰ 在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定
刘晓辉,梁述文,王伟,申泉,郭焱
利用PCR、删除突变和基因重组技术构建了N端缺失3个氨基酸的人胰岛素样生长因子-[des(1-3)IGF-]的表达载体pExSec/IGF,在大肠杆菌蛋白酶缺陷株BL21(DE3)中,通过用IPTG于超常规的12℃低温诱导16h,des(1-3)IGF-获得了可溶性表达。表达水平达到可溶性细菌总蛋白约15%。经超滤和SephadexG-50凝胶过滤,des(1-3)IGF-纯度分别达到49%和82%,且表现出明显的免疫学活性和刺激Balb3T3细胞增殖的生物学活性。
中国生物化学与分子生物学报
):&738-741
稳定表达促红细胞生或素的重组腺病毒的构建及其对大鼠的促红细胞生成作用
崔振中,王晓民,梁德勇,张淑琴,韩济生
用EPO基因组基因构建了腺病毒质粒型载体psp1B/hEPO,该质粒含有以RSV-LTR为启动子的完整的EPO基因表达盒.单独转染CHO细胞,经暂态表达检测到EPO的表达。用psp1B/hEPO与腺病毒拯救型载体pBHG11共转染293细胞,获得了表达EPO的重组腺病毒AdhEPO.经Southern杂交证实AdhEPO中有EPO表达盒,ELISA检测到了EPO阳性表达.用5×108pfu的AdhEPO给大鼠作一次性肌肉注射,观察到了其促进大鼠红细胞生成的短期效应。在注射后第1,3,5,7,10d分别检测了大鼠的红细胞压积、血红蛋白含量和红细胞计数等指标,发现大鼠的红细胞数量显著提高。在第10d红细胞压积从46±4%上升至65±6%。证实了重组腺病毒AdhEPO具有潜在的临床应用价值,可用于贫血症的基因治疗。
中国生物化学与分子生物学报
):&742-746
重组α-银环蛇毒素的纯化及活性分析
段海清,张兆山,李淑琴,黄翠芬
以表达重组α-银环蛇毒素的高效表达菌株BL21(PDZ04)为材料,研究重组α-银环蛇毒素(α-bungarotoxin,α-BgTx)的分离纯化.采取亲和色谱和离子交换色谱的方法都得到了重组α-银环蛇毒素的纯品.首先从天然的银环蛇毒干粉中分离纯化得到了天然α-银环蛇毒素的纯品.然后以天然α-银环蛇毒素为对照来检测重组α-银环蛇毒素的抗原性和毒性.ELISA结果显示其具有与天然α-银环蛇毒素相似的抗原性,以小鼠为动物模型,纯化的重组α-银环蛇毒素与天然α-银环蛇毒素相比,其腹腔注射的LD50也基本一致,约为0.22μg/g.结果表明利用基因工程的方法生产蛇神经毒素是可行的.
中国生物化学与分子生物学报
):&747-751
白细胞介素2亲和性配体的筛选
齐杰,周长城,周慧,李惟,刘北一,李一,富宁
白细胞介素2(IL-2)及其受体拮抗剂的研究对免疫抑制药物的研制具有重要作用.抗白细胞介素2受体α链中和性单克隆抗体5G1(抗Tac型抗体)能够特异性地阻断IL-2与其受体的结合.因此,5G1可作为目标分子被用来在噬菌体展示肽库中筛选白细胞介素2的亲和性配体.经过4轮亲和性筛选以及5G1亲和活性的测定,6个具有明显5G1亲和活性的噬菌体克隆被发现.DNA序列分析结果显示出,所得到的肽序列具有明显的保守性,即SSFT(L/P)I.该序列与IL-2受体α链没有同源性.因此,SSFT(L/P)I可能模拟了IL-2受体α链上的一个不连续表位(mimotope),为白细胞介素2亲和性配体片段.
中国生物化学与分子生物学报
):&752-755
虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ-(HWTX-Ⅰ)28肽类似物的化学合成与活性鉴定
廖黔宁,罗静初,周培爱,顾孝诚,梁宋平
虎纹捕鸟蛛毒素-(huwentoxin-,HWTX-)是从我国虎纹捕鸟蛛毒素中分离纯化得到的一种多肽类神经毒素.该多肽分子由33个氨基酸残基组成,含三对二硫键.其一级结构和三级结构均已测定.弄清该毒素的活性部位,是研究其结构功能关系的基础.用固相Fmoc化学合成的方法,合成了虎纹捕鸟蛛-的28肽类似物.该突变体去掉了天然毒素分子N端的Alal和C端的Lys30-Trp31-Lys32-Leu33共5个残基.用氧化还原型谷胱甘肽法完成二硫键配对,并用HPLC进行纯化,所得突变体与天然HWTX-的紫外光谱相似.质谱鉴定确认合成产物正确,分子量为3124,浓度为1×10-5g/ml的突变体能可逆阻断小白鼠膈神经-膈肌的接头传递,阻断时间为60～70min.与天然毒素比较,活性有所下降.结果说明HWTX-的N端、C端残基对其生物活性有一定影响,但不是位于活性中心的重要残基.由结果推测,虎纹捕鸟蛛毒素-的活性中心位于该分子中连接β-折叠的回环区
中国生物化学与分子生物学报
):&756-761
尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素DaHT-3的纯化与性质
叶文娟,冉永禄,赖仞,龚光林,俞帆,曾昭权
被尖吻蝮蛇咬伤会引起严重的出血,对蛇毒出血毒素的研究有利于治疗蛇伤出血药物的筛选.通过SephadexG-75,DEAE-SephadexA-50,SephadexG-200和两次PBE聚焦层析,从尖吻蝮蛇(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化到一个分子量为56000的出血毒素(DaHT-3),经氨基酸组成测定计算,由487个氨基酸残基组成.此成分在SDS-PAGE上显示出一条均一的蛋白染色带,用等电聚焦电泳测定,其pI为5.50.该出血成分的最小出血剂量是2.6μg,具有蛋白水解酶活力,其活力为3.68,但没有精氨酸酯酶和磷脂酶A2活力.用红外光谱仪研究DaHT-3在溶液中酰胺I带的吸收谱,该毒素含有31.8%的α螺旋、56.1%的β折叠和12.1%的转角;当加入EDTA螯合剂去除金属离子后,它们的α螺旋、β折叠、转角和无规卷曲分别变为11%、26.4%、46.2%和16.5%,而出血活力和蛋白水解酶活力均丧失,表明该出血毒素是金属蛋白酶
中国生物化学与分子生物学报
):&762-767
蓖麻毒素与其单克隆抗体相互作用动力学研究
高新胜,黄仪秀,朱圣庚,余兴龙,王冬,沈平
表面等离子体激元共振(SPR)是一种可微量、实时、动态地监测生物分子相互作用的生物传感技术。蓖麻毒素为核糖体失活蛋白,具有很强的细胞毒性作用。通过SPR技术研究了两种抗蓖麻毒素的单克隆抗体C5、D12与蓖麻毒素相互作用的动力学,计算出两者的亲和常数分别为2.49×108mol-1·L和7.9×108mol-1·L,并对两种抗体的抗原表位进行了分析。
中国生物化学与分子生物学报
):&768-771
金属硫蛋白α和 β结构域的结构功能比较研究
周妍娇,熊燚,李令媛,茹炳根
金属硫蛋白具有α和β两个独立的结构域,它们结构不同,并能独立的行使功能。为了进一步研究这两个结构域之间的区别,分别采用镉和铜重组金属硫蛋白并继以枯草杆菌蛋白酶水解的方法制备α和β结构域,以及利用pGEX-4T-1这种融合表达载体表达α和β结构域。所得产物经凝胶过滤层析分离纯化后,进行了氨基酸组成,巯基和金属含量以及分子量测定,以上性质均与天然的金属硫蛋白α和β结构域相同。然后利用紫外吸收光谱和圆二色吸收光谱来研究它们的巯基金属簇结构,从UV和CD图谱可以看出,通过蛋白水解和基因表达制备的α和β结构域都具有独立的镉硫金属簇结构,但β结构域的镉硫金属簇不如α结构域紧密,其在254nm的吸收峰不象α结构域那么明显。利用DTNB的竞争反应测定了α和β结构域对镉和锌的结合力,实验结果表明,α结构域倾向于结合Cd2+,β结构域倾向于结合Zn2+。以上研究对于进一步了解α和β结构域的生理功能和分子进化提供了有利的证据。
中国生物化学与分子生物学报
):&772-778
啤酒酵母生产的重组水蛭素的纯化及脱色
昝云红,孙茂盛,李智华,徐彤浩,李健峰,姬秋彦,马雁冰,戴长柏
对啤酒酵母生产的重组水蛭素变异体1(rHV1)进行多步骤的纯化。首先将分泌到培养上清液中的水蛭素进行硫酸铵沉淀和SephadexG-50凝胶过滤,再用Q-SepharoseHP阴离子交换层析分离,最后用HPLCSP-5PW阳离子交换柱脱色及HPLCC8柱反相层析。真空干燥后得到的水蛭素蛋白经SPS-PAGE、N端氨基酸序列分析、抗凝血酶活力分析鉴定,证明已获得高纯度的重组水蛭素HV1制剂,为利用基因工程方法生产重组水蛭素的规模化生产及临床应用提供了依据
中国生物化学与分子生物学报
):&779-781
眼镜蛇毒纤维蛋白原溶解因子的纯化及理化性质的研究
朱正光,吴曙光
经Heparin-SepharoseCL-6B亲和层析和SephadexG-150分子筛层析,从中国眼镜蛇毒(Najanajaatra)中纯化出一种可水解纤维蛋白原Aα链的蛋白酶——组分F.SDS-PAGE测得分子量为47100,为一含2%中性己糖的单肽链糖蛋白;它对纤维蛋白、酪蛋白和苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)均无水解作用,也无激活纤溶酶原的作用;100μg皮下或皮内注射,未见出血反应。组分F对酸和热均不稳定。EDTA,EGTA,PMSF和肝素等可抑制其纤维蛋白原溶解活性,benzami-dine,aprotinin和大豆胰蛋白酶抑制因子(SBTI)则无抑制作用。
中国生物化学与分子生物学报
):&782-786
人小肠三叶因子的理化性质及光谱学行为
口如琴,王蔚,李令媛,茹炳根
酵母表达的重组人小肠三叶因子(rh-ITF)飞行质谱测定二聚体的分子量为13154,等电点约为4.5～4.75.紫外和荧光光谱表明rh-ITF在pH2.7～8.4和pH2.7～7.7时,吸收值增加。随pH进一步增加,吸收值降低。推测色氨酸和酪氨酸所处微环境发生了一定的变化。园二色谱表明在不同pH下,rh-ITF所含二级结构百分数有所变化,但仍保留有一定的二级结构,即含有一定数量的α-helix,β-sheet或β-turn,其三级结构基本不变。光电滴定和有机溶剂微扰法表明rh-ITF分子中有两个酪氨酸,一个处于分子表面,另一个参与氢键的形成或存在于一个非极性的环境中。rh-ITF中的色氨酸处于分子内部。另外,质谱测定rh-ITF在体外对酸和蛋白酶有一定的抗性
中国生物化学与分子生物学报
):&787-791
天花粉蛋白Glu189在N-糖苷酶活性中的作用
李建辉,吴伸,姚宏兵,邵鹏柱,董贻诚
培养了(E160A,E189A)TCS(天花粉蛋白)的单晶。用浸泡法得到了(E160A,E189A)TCS与Ade复合物的晶体。在MarResearch面探测器系统上分别收集了均为0.20nm分辨率的X射线衍射数据,数据处理用MarScale程序系统完成。用同晶差值Fourier法解析了(E160A,E189A)TCS和(E160A,E189A)TCS-Ade的晶体结构,结构修正利用X-PLOR程序.修正结果,晶体学R因子分别为0.180、0.184,键长和键角的RMS偏差分别为0.0012nm和2.566°、0.0012nm和2.622°。在(E160A,E189A)TCS-Ade中,Ade仍结合在N-糖苷酶活性口袋之中,它夹在Tyr70和Tyr111两个侧链环之间,与Tyr70环近乎平行。这一结果表明:TCS中的Glu160和Glu189同时突变成Ala,仍能与AMP发生N-糖苷酶反应.前文已经证明在(E160A)TCS中Glu189没有援救作用。目前,没有发现Glu189对TCS与AMP的直接作用,但Glu189与其它残基的协同作用及其在TCS与rRNA作用中扮演什么角色,尚待进一步研究。
中国生物化学与分子生物学报
):&792-796
家蚕系统表达的重组人丁酰胆碱酯酶的生化性质
魏婉丽,张翰,秦浚川,孙曼霁
研究家蚕系统中高效表达的重组人丁酰胆碱酯酶(rhBChE)的生化性质并与天然人丁酰胆碱酯酶(nhBChE)进行比较。采用丁酰胆碱酯酶活性测定,抑制剂及重活化剂作用,免疫印迹等方法。实验结果表明,rhBChE及nhBChE在底物亲和力、抑制剂敏感性及可重活化性、稳定性、对抗体的反应性等方面均有相似的生化性质,重组人丁酰胆碱酯酶具有天然人丁酰胆碱酯酶的功能。但rhBChE的糖基化修饰程度较低,用于人体时应予考虑
中国生物化学与分子生物学报
):&797-801
豆壳过氧化物酶的盐酸胍变性与化学修饰研究
刘稳,方靖,高培基
研究了盐酸胍对豆壳过氧化物酶(soybeanhullperoxidase,SHP,EC1.11.1.7)构象与活力的影响,发现去辅基SHP的盐酸胍变(复)性及荧光变化关系与SHP全酶分子的盐酸胍变(复)性及荧光变化关系明显不同。应用过碘酸氧化法去除SHP分子表面糖链,研究糖链去除对酶性质的影响,则证实了SHP分子表面的糖链去除导致酶热稳定性下降。应用不同的蛋白质侧链修饰剂对SHP进行化学修饰则表明,巯基、酪氨酸和色氨酸残基为酶活力非必需,而羧基、组氨酸和精氨酸残基为酶活力所必需。
中国生物化学与分子生物学报
):&802-807
关于巯基和Mn~(2+)介导豆壳过氧化物酶氧化藜芦醇的研究
刘稳,方靖,高培基
藜芦醇作为非酚型木素模型物具有较高的氧化还原电位,豆壳过氧化物酶(soybeanhullperoxidase,SHP,EC.1.11.1.7)通过依赖于过氧化氢的正常过氧化物酶催化循环不能氧化藜芦醇,但在还原型谷胱甘肽、Mn2+和有机酸络合剂存在下却可以通过不依赖于过氧化氢的氧化酶反应途径完成对藜芦醇的氧化,产物为藜芦醛,反应最适pH为4.2。动力学研究表明该反应遵循顺规序列反应机制;对藜芦醇的表观KM值为4.3mmol/L,对谷胱甘肽的表观KM值为4.8mmol/L。巯基还原剂二硫苏糖醇、L-半胱氨酸和β-巯基乙醇亦可替代还原型谷胱甘肽促进藜芦醇氧化
中国生物化学与分子生物学报
):&808-812
脱辅基细胞色素c定向于线粒体的转运特异性研究
王小平,苗琦,韩学海
用分离纯化的完整线粒体和部分细胞器组分,初步研究了脱辅基细胞色素c在细胞内转运的特异性。完整线粒体用差速离心和密度梯度离心的方法,从幼龄鸡心肌组织中获得,对胞内几种细胞器标志酶比活力的测量表明,纯化的线粒体单胺氧化酶活力提高25.6倍,腺苷酸激酶活力提高3.59倍,细胞色素c氧化酶活力提高5.48倍,外膜完整性达90%以上,呼吸控制率大于20。以上数据表明该纯化的线粒体受胞内其它囊泡成分污染少,外膜完整并具有较高的氧化磷酸化偶联效率;在纯化线粒体的同时,得到另两种细胞器组分-内质网和溶酶体囊泡。体外转录翻译的apo.c与上述几个组分的结合实验表明,完整线粒体与apo.c的结合能力明显高于其它组分。
中国生物化学与分子生物学报
):&813-819
GM1对肌质网Ca~(2+)-ATPase活性及膜流动性的影响
王玉苓,崔肇春,杨福愉
外源性GM1对肌质网Ca2+-ATPase的水解及转运活性都有明显的抑制作用.在GM1浓度为0～8nmol/mg蛋白质范围内抑制作用具有浓度依赖性.当GM1浓度达到8nmol/mg蛋白质时,酶活性受到最大抑制,此时水解活性降低51%,转运活性降低49%.荧光偏振测定结果表明:GM1参入后,肌质网膜流动性降低.
中国生物化学与分子生物学报
):&820-823
佛波酯促进NIH3T3细胞的铺展和聚焦粘附激酶的酪氨酸磷酸化
涂立宇,方新初,查锡良
100nmol/L佛波酯(12-O-tetradecanoylphobol-13-acetate,TPA)能明显促进NIH3T3细胞在纤连蛋白(Fn)上的铺展,该作用能分别被酪氨酸激酶(tyrosinekinase,TK)抑制剂4′,5,7-三羟基异黄酮(genistein)和蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)抑制剂calphostinC和神经鞘氨醇(sphingosine)所抑制.TPA作用于结合到Fn上的NIH3T3细胞,使其聚焦粘附激酶(focaladhe-sionkinase,FAK)的酪氨酸磷酸化程度较未处理细胞升高,于30min时达对照的204.0%,并存在浓度依赖性;该变化分别被上述抑制剂所拮抗;未经TPA处理的NIH3T3细胞和纤连蛋白结合诱导的FAK酪氨酸磷酸化亦分别被上述抑制剂所抑制.细胞松弛素D则无论TPA作用与否,都能完全阻断NIH3T3细胞的铺展和FAK的酪氨酸磷酸化.以上结果提示,TPA促进NIH3T3细胞在Fn上铺展的信号转导机制,与PKC的激活有关,进一步则可能通过影响FAK的酪氨酸磷酸化来实现,同时需要细胞骨架的参与;NIH3T3细胞和Fn结合并诱导FAK酪氨酸磷酸化的过程亦依赖于PKC和完整的细胞骨架.
中国生物化学与分子生物学报
):&824-828
肝素对人类神经tau蛋白分子聚集及磷酸化的影响
罗健颖,陈永辉,赫荣乔
在老年性痴呆患者的脑中,肝素与超磷酸化的tau蛋白共存[7].采用NCLK(neuronalcdc2-likekinase)及PP2B(phosphoproteinphosphatase2B)在含肝素的体系中对人类神经tau蛋白进行磷酸化和脱磷酸化,结果表明,肝素具有促进tau蛋白被磷酸化的功能,并促进该蛋白磷酸化分子二聚体的形成和单体的减少,其一级动力学常数分别为2.88×10-3s-1和1.74×10-3s-1.PP2B可使磷酸化的tau蛋白脱磷酸化,并且脱磷酸化作用随肝素浓度的增加而增强,提示肝素可能具有调节tau蛋白磷酸化状态的作用
中国生物化学与分子生物学报
):&829-832
人结缔组织生长因子(CTGF)的原核表达研究
李琦涵,赵红玲,和绍清,王丽春,赵树栋,王炯
随着对细胞前早期基因认识的深入,一组在多个种群中具有较高同源性的前早期基因家族——CCN(CTGF,Cyr61/Cef10,Nxov)得到了人们的注意[1]。其产物在细胞受到创伤刺激时产生,并具有促进和调节创伤修复的功能.其中的人结缔组织生长因子(CTGF)由于对成纤维细胞、结缔组织基质...
中国生物化学与分子生物学报
):&833-835
尖吻蝮蛇毒NAD糖苷水解酶荧光光谱和荧光猝灭研究
陈真龙,刘清亮,张玉慧,余华明,张祖德
70年代就有报道从蛇毒中提纯NAD糖苷水解酶(NADase,E.C.3.2.2.5)和一些生物性质方面的研究.Huang等[1]从皖南尖吻蝮蛇毒中分离得到的NADase是由两个相同亚基组成,含糖33%,等电点为7.6.刘清亮等[2]研究了NADase的ESR谱,推知Cu2+离子至少与三个氮原子配位.本文主要研究多种?..
中国生物化学与分子生物学报
):&834-844
多串心钠素的纯化与活性测定
赵明,马康涛,张迺蘅
为获得纯化心钠素(ANP)单体,采用离子交换及疏水柱层析,纯化融合蛋白麦芽糖结合蛋白(MBP)-ANP和MBP-3ANP,用凝血因子Xa切割MBP-ANP后,经阳离子柱分离获得ANP单体.对ANP单体与BMP-3ANP进行生物学活性检测.1　材料与方法1.1　材料含心钠素多拷贝基因的重组表达质粒pMal-nANP...
中国生物化学与分子生物学报
):&836-838
氧化修饰HDL对培养人主动脉平滑肌细胞胆固醇流出的影响
江渝,刘秉文
大量研究显示,高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein,HDL)具有抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用.这是由于HDL能够促进外周组织如血管壁内皮细胞、平滑肌细胞(smoothmusclecell,SMC)及巨噬细胞储集的胆固醇流出,并将其转移到肝脏通过胆汁分泌而排出体外[1],这一过程...
中国生物化学与分子生物学报
):&839-842
乌本苷免疫活性物和组织中钠泵容量的关系
李素琴,符云峰,W.SCHONER,C.EIM
依赖于Na+、K+的Na+-K+-ATP酶(EC3.6.1.3,钠泵),广泛存在于哺乳类动物细胞质膜上,是催化Na+、K+跨膜主动运输的质膜酶,除维持正常的细胞内外离子浓度梯度外,对细胞能量代谢也有重要影响,许多疾病的发生是由于钠泵活性异常引起.研究证明有2种特异性的内源性钠泵抑制因子在?..
中国生物化学与分子生物学报
):&845-847
Cu~(2+)、Pb~(2+)和Cd~(2+)对荞麦种子中抗氧化酶活性的影响
张政,王转花,林汝法,陈丽
近年来,有关荞麦降血脂、降血糖和抗衰老等的作用引起国内外生化、营养和医药学界的普遍关注[1,2].一些研究表明,荞麦中富含超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等能够清除机体内超氧阴离子自由基(O-·2)、羟自由基(·OH)和H2O2等有害物质?..
中国生物化学与分子生物学报
):&848-851
Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biol
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