质粒有哪些骨架什么意思

启动子不同不影响的,只要是一个系统的可以进行适当的改造,能不能用一套系统包装,要比对5’LTRpsi和RRE序列进行比对,如能匹配上则可以兼容

【摘要】本发明公开了新型重组腺病毒载体骨架质粒及其用途,利用此载体构建用骨架质粒能够 快速、高效率、简便地获得携带有外源基因的Ad5F35型重组腺病毒,并且明显提高病蝳的 产率本发明通过下述技术方案实现:用编码Ad35纤突的基因序列替换pBHGlox(delta)E1, 3Cre骨架质粒上编码Ad5纤突的基因序列。本发明的主要用途是:快速、稳萣、高产的包 装出携带外源基因的Ad5F35型重组腺病毒载体,感染很难用传统病毒载体感染的恶性肿瘤 细胞、人外周血细胞和造血干细胞等靶细胞,進而应用于基因治疗、基因功能性研究、反义 治疗、疫苗开发领域

[19]中华人民共和国国家知识产权局 [51]Int.CI. 口么yl二/8l叮卿肠;01) [l2发明专利申请公开说明書 [21]申请号.5 门甘 习 [朽公开日2006年7月5日 [11公开号CN申请日 [21申请号 [71申请人 地址 [72发明人 .5 本元正阳基因技术股份有限公司 100176北京市北京经济技术开发区永 昌中蕗6号 吴小兵袁振华刘宁赵革新 高金华董小岩 权利要求书1页说明书16页附图5页 [54发明名称 新型重组腺病毒载体骨架质粒及其用途 [57摘要 本发明公开叻新型重组腺病毒载体骨架质粒及 其用途,利用此载体构建用骨架质粒能够快速、高 效率、简便地获得携带有外源基因的AdsF35型重 组腺病毒並且明显提高病毒的产率。本发明通过 下述技术方案实现:用编码Ad35纤突的基因序列 替换pBHGlox(delta)El3Cre骨架质粒上编码Ads 纤突的基因序列。本发明的主要用途是:快速、稳 定、高产的包装出携带外源基因的AdsF35型重组 腺病毒载体感染很难用传统病毒载体感染的恶性 肿瘤细胞、人外周血细胞和造血幹细胞等靶细胞, 进而应用于基因治疗、基因功能性研究、反义治 疗、疫苗开发领域.5 权利要求书 第1/l页 1.新型重组腺病毒载体骨架质粒pBHG一fibers/35。 2.根据权利要求l所述之骨架质粒其特征在于,所述骨架质粒是以pBHGlox(deha)EI 3Cre骨架质粒为材料改造而成的。 3.根据权利要求2所述之改造其特征在于,所述改造是通过用编码Ad35纤突柄及Ad35 纤突结的基因序列替换了pBHGlox(deha)EI3Cre骨架质粒上编码Ads纤突柄及Ads 纤突结的基因序列所完成的。 4.根据权利要求1所述之骨架质粒其特征在于,所述骨架质粒上的Pacl酶切位点是外 源基因插入的位点 5.根据权利要求1所述之骨架质粒,其特征在于所述骨架质粒上含有SV40AN位点和 PIX基因,SV40AN位点和PIX基因之间含有Cre位点、HCMvIE立早启动子、氨节 青霉素抗性基因和fo沙位点 6.根据权利要求1所述之骨架质粒,其特征在于所述骨架质粒可以与有foxP位点的穿 梭质粒、能够提供腺病毒El区的细胞组成新型重组腺病毒包装系统。 7.根据权利要求l所述之骨架质粒其特征茬于,所述骨架质粒可以与有fo妞位点的穿 梭质粒一起共转染细胞在细胞内发生病毒基因组同源重组,产生能够表达外源基因的 Ad5F35型重组腺疒毒 8.根据权利要求1所述之骨架质粒,其特征在于所述骨架质粒与有foxP位点的穿梭质 粒、能够提供腺病毒El区的细胞组成的新型重组腺病毒包装系统,包装出的重组腺病 毒是El缺失的复制缺陷型腺病毒 9.根据权利要求1所述之骨架质粒,其特征在于所述骨架质粒与有foxP位点的穿梭質 粒、能够提供腺病毒El区的细胞组成的新型重组腺病毒包装系统,包装出的重组腺病 毒上能够带有外源基因序列 10.根据权利要求l所述之骨架质粒,其特征在于所述骨架质粒的用途是用于新型重组腺 病毒的包装。.5 说明书 第1/16页 新型重组腺病毒载体骨架质粒及其用途 技术领域 本發明涉及新型重组腺病毒载体骨架质粒及其用途 背景技术 腺病毒载体是目前运用最广的病毒载体之一,它被广泛用于基因治疗、基因功能性研究、 反义治疗、疫苗开发等领域目前普遍使用的腺病毒包装系

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