丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制剂的竞争性抑制作中实验结束后,剧烈震荡第一管,会出现什么现象，为什么

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2021-05-28 13:43 标签： 琥珀酸脱氢酶抑制剂

实验五　琥珀酸脱氢酶抑制剂的莋用及其竞争性抑制

1、掌握竞争性抑制概念及作用机理

2、了解在无氧情况下观察脱氢酶作用的简单方法。

存在于心肌、骨骼肌、肝脏等組织中琥珀酸脱氨酸能使琥珀酸脱氢而成延胡索酸，脱下氢可使甲烯蓝退色还原为甲稀白。反应如下：

草酸、丙二酸等在结构上与琥珀酸相似可与琥珀酸竞争与琥珀酸脱氢酸的活性中心结合。若酶已与丙二酸等结合则不能再与琥珀酸结合而使之脱氢，产生抑制作用且抑制程度取决于琥珀酸与抑制剂在反应体系中浓度的相对比例，所以这种抑制是竞争性抑制本实验通过观察在由不同浓度的琥珀酸與丙二酸组成的反应体系中使等量甲稀蓝退色反应时间，从而验证丙二酸对琥珀酸的竞争性抑制作用

（2）0.093mol/L琥珀酸钠溶液：取琥珀酸钠1.5g溶於100ml蒸馏水中。

（3）0.10mol/L丙二酸钠溶液：取丙二酸钠1.5g溶于100ml蒸馏水中

（4）0.02%甲稀蓝溶液。

（2）0.93mol/L琥珀酸钠溶液：取琥珀酸钠1.5g溶于100ml蒸馏水中

（3）0.10mol/L丙二酸钠溶液：取丙二酸钠1.5g溶于100ml蒸馏水中。

（4）0.02%甲烯蓝溶液

（1）恒温水浴箱　　　　　　（2）研钵或组织匀浆机

新鲜免肝立即剪碎，放于组織匀浆机中研碎加入pH7.4的0.10mol/L磷酸盐缓冲液，制备成200g/L的肝匀浆液备用取五支试管分别编号，按下表配制反应体系：

将各管溶液混匀后加一薄層液体石蜡后静置（此时不可摇动!）观察各管中的颜色变化，并记录各管颜色完全变化的时间

1、抑制的分类及其特点？

2、本实验中液體石蜡起什么作用?

3、各管中的反应体系配好后为什么不能再摇动?

4、制备肝浆时用磷酸缓冲液可否换用蒸馏水，为什么

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