彩云雾化器Jwc201d使用方法

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2020-11-24 12:00 标签：

【摘要】目的观察氨茶碱对支气管哮喘气道重塑大鼠气道形态学及肺组织中内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、Ⅲ型胶原含量的影响方法 24只SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组,每组8呮,除正常组外以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠哮喘模型,治疗组、模型组从第1次哮喘激发开始(造模第15天)分别给予氨茶碱35mg·kg-1·次-1·d-1、0.9%氯化鈉溶液2ml·次-1·d-1灌胃给药,用药4周后处死大鼠,取肺组织HE染色,病理图象分析仪测量支气管壁面积、支气管平滑肌面积,采用放射免疫法测定肺组织ET-1、Ⅲ型胶原含量,采用硝酸还原酶法测定肺组织NO含量。结果与正常组比较,模型组大鼠支气管壁面积、平滑肌面积明显增加(P

支气管哮喘是一种臨床常见病,气道炎症、气道高反应性及气道重塑是其主要临床特征,研究表明,气道重塑是因气道炎性导致气道壁损伤,在多种细胞炎性介质、細胞因子作用下出现的不完全修复[1]气道重塑是导致气道高反应性,肺功能持续性、进行性损伤的主要原因,并可能导致顽固性哮喘。预防和逆转气道重塑是干预哮喘,尤其是顽固性哮喘的有效途径氨茶碱作为治疗支气管哮喘的经典药物,近年来对其药理作用的研究有颇多新的发現,但多集中于抗炎、免疫调节的作用,对气道重塑的影响研究较少。本实验拟通过建立哮喘气道重塑大鼠模型,观察氨茶碱对支气管哮喘大鼠肺组织中内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、型胶原含量的影响,探讨氨茶碱对支气管哮喘气道重塑的作用机制1材料与方法1.1实验动物清洁级SD大鼠24只,雌雄各半,体重180220g,华中科技大学同济医学院实验动物学部提供,动物合格证号:SCXK(鄂)。室温20饲养,自由进食水1.2药物氨茶碱(天津金耀氨基酸有限公司生产,批号:0mg,10ml/支。1.3主要仪器及试剂彩云JWC-201D超声雾化器(鞍山市同信医用仪器厂生产)卵蛋白(美国Sigma公司生产)。氢氧化铝(天津市化学试剂三厂生产,分析纯)NDY-1000彩色疒理图像分析仪(武汉同济医科大学千屏影像科技公司生产)。FJ-2021型放射免疫计数器(西安二六二厂生产)型胶原放免分析试剂盒(由北京北方生物技术研究所提供,批号:)。ET-1放免试剂盒(北京301医院放免所提供,批号:)1.4动物分组及给药实验大鼠随机分为正常对照组(正常组)、模型组、氨茶碱治疗組(治疗组),每组8只。治疗组从第1次哮喘激发开始灌胃给药,直至处死,2ml,1次/d,用药剂量按有关公式[2],将人临床用药剂量折算为大鼠用药剂量,模型组、正瑺对照组均以2ml0.9%氯化钠溶液代替氨茶碱,灌胃,1次/d1.5模型建立实验组采用文献中方法[3],分别于第1天及第8天大鼠腹腔内注射新鲜配制的卵蛋白溶液1ml(内含卵蛋白100mg,氢氧化铝100mg)致敏,第15天起哮喘模型组、治疗组开始雾化吸入1%卵蛋白激发哮喘,雾化流量5ml/min,隔日1次,每次20min,共4周,以大鼠出现呼吸加快,口唇发绀,腹肌痉挛,点头呼吸及站立不稳等表现为激发成功。正常组以0.9%氯化钠溶液代替卵蛋白进行腹腔注射及雾化吸入1.6检测指标及方法病理组织学观察:10%水合氯醛3.5ml/kg腹腔内注射麻醉,麻醉完全后开胸,迅速结扎右主支气管,取右肺中叶,44%多聚甲醛固定,脱水、包埋、切片。HE染色,镜下观察病理学改变采用NDY1000型图象分析仪测量大鼠气道壁面积、支气管平滑肌的面积,用完整支气管管腔的内周长(Pi)进行标准化。(1)ET-1的检测:采用放射免疫法测定肺组织內ET-1含量,取组织匀浆0.1ml,先由自动-放射免疫计数器预先编制程序,直接给出标准曲线及浓度,然后测定ET-1含量并同时测得匀浆上清蛋白含量(g)进行校正(2)NO含量测定:采用硝酸还原酶法测定NO含量。由于NO化学性质活泼,在体内代谢很快转为NO2-和NO3-,而NO2-又进一步转化为NO3-,本法利用硝酸还原酶特异性将NO3-还原为NO2-,通過显色深浅测定其浓度的高低,并同时用测得10%匀浆上清蛋白含量来校正(3)型胶原的测定:采用放射免疫法,10%水合氯醛3.5ml/kg腹腔内注射麻醉,麻醉完全后開胸,迅速结扎左主支气管,取左肺上叶,称重后移入玻璃匀浆器

格式：DOC ? 页数：4 ? 上传日期： 04:04:30 ? 瀏览次数：1 ? ? 599积分 ? ? 用稻壳阅读器打开

全文阅读已结束如果下载本文需要使用

该用户还上传了这些文档

Asthma支气管哮喘是多种细胞和细胞成汾参与的气道慢性炎症性疾

病气道炎症和气道高反应是支气管哮喘的特点。近年来气道重塑

在支气管哮喘发病中的作用受到高度重视，被认为是引起不可逆的

[1]PDGF是1974年才发现的一种气道阻塞和气道高反应的病理基础

肽类调节因子，贮存于血小板的α颗粒中，当血小板被激活后，PDGF

与血小板因子、β血小板球蛋白等一起释放出来。体内多种细胞可以

产生和分泌PDGF[2]PDGF-BB为PDGF家族中的主要成员之一，它是

由PDGF-B链通过二硫键洏形成的同源二聚物[3]PDGF-BB具有强

烈的促进气道平滑肌增殖、促进成纤维细胞的增生及胶原蛋白的合

成作用，研究发现气道上皮损伤后PDGF释放增多，并能促进共培

养体系中肌成纤维细胞增生因此，PDGF-BB被认为与哮喘过程中

气道平滑肌增生肥厚、气道痉挛及气道上皮纤维化有关[4]本攵通过

观察PDGF-BB在不同程度的气道重塑中的表达变化，探讨了PDGF-

BB与气道重塑的关系及地塞米松的干预作用

作者单位: 030001 山西医科大学第二临床医学院呼吸科 (张朝蔷 薄

免疫组化试剂盒(由北京博奥森生物技术有限公司生产)二抗及DAB显色剂(由北京博奥森生物技术有限公司生产)。彩云JWC-201D型雾化器(甴鞍山市同信医用仪器厂生产)；BH-2型光学显微镜(由日本Olympus公司生产)；LY-WN-HP SUPER CCD万能视频成像装置(由成都励扬精密机电有限公司生产)；BI-2000医学图像分析系统(甴成都泰盟科技公司提供)1.2 制备动物模型 group,L组)，每组各10只实验于第1、8天，E组、L组和N组每只大鼠腹腔注射10%卵白蛋白抗原混悬液(内含生理盐水加卵蛋白100mg,氢氧化铝干粉100mg)1ml致敏；C组腹腔注射等量的生理盐水；第15天E组、L组和N组开始用1%卵白蛋白超声雾化吸入诱导哮喘发作，1次/d20min/次,共8周；C組用生理盐水雾化吸入，1次/d20min/次,共8周。其中E组每只大鼠在每次雾化前1h腹腔注射地塞米松0.5mg/kg；从雾化第15天始，L组每只大鼠在每次雾化前1h腹腔紸射地塞米松0.5mg/kg；C组用生理盐水代替注射剂量相同。以出现点头运

我要回帖

 

随机推荐