新手妈妈常见问题求助，关于正版的问题

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-03-06 17:21 标签： vr女友正式版闪退问题
拒绝访问 | bbs.yanyue.cn | 百度云加速
请打开cookies.
此网站 (bbs.yanyue.cn) 的管理员禁止了您的访问。原因是您的访问包含了非浏览器特征(3f9d27aa854d43cb-ua98).
重新安装浏览器，或使用别的浏览器新手求助！关于网站空间和3大标签的问题_搜外问答
我的网站是www.qzdchj.com1.我是在某宝买的是香港空间，我自己经常打开都很慢甚至打不开，现在想换个国内备案的空间，请问我这个网站能不能个人备案？在换空间的过程中要注意什么？（好像还要什么闭站保护？）2.我site网站时发现一些不知道是什么页面，研究了下不知道是不是tag页，不能编辑啊，标题显示是乱码的？请问怎么办啊？3.不知道是不是新站的原因，我更新原创文章百度都不收录。而且炒货机这个关键词没有排名，听了一节某学院的课，说是我的标题写的不好，我想了下，是不是这样写比较好（炒货机,炒货机价格,炒瓜子机,炒板栗机_许昌智工机械制造有限公司）就是怎么提升炒货机这个词的排名！
分享到微信
1、你这个炒货机属于商品，估计个人不好过2、收录之所以为调用网站网址，是因为你当前页面没有，所以自动抓取的是网页网址，之所以会出现，是因为网页网址或者是网站下是不允许出现文字命名的文件夹的，出现的时候就会显示乱码，你修改成字母或者数字就行。另外本质是因为你这些个页面没有写标题，才会调用了网址，如果正常写了标题的话，就没什么事儿了。3、新站其实收录也不慢，只是百度对新站有考察期，其实网站内容已经被收录了，只是还没有放出来，新站最重要的要保持稳定更新，适当发些外链引。
其实网站内容已经被收录了，只是还没有放出来，在百度里面其实是存在的，只是没有表现出来给你看，等你看到了，就是缓存之后的数据了
30天内高手都在交流什么
(0 个回答)
(0 个回答)
(1 个回答)
(7 个回答)
(12 个回答)
(3 小时前)
(16 小时前)
(18 小时前)
(18 小时前)
(21 小时前)
给问题设置一定金额，将更容易获得关注与回答。
选择支付方式当前位置：
&新手求助~关于克隆的若干问题~
新手求助~关于克隆的若干问题~
作者 珍藏版怡
最近克隆一个2300bp左右的片段，用的是p-GEMT载体。总是连接不上，不知道是哪里出了问题~
PCR产物胶回收纯化后~
连接体系：PCR产物 3 ul
& && && && && &&&buffer& &&&5ul
& && && && && & 载体& && && &1ul
& && && && && & T4连接酶 1ul
4度过夜连接，感受态用的是全是金的trans-t1.全量连接产物加到50ul感受态冰浴半小时，42.4度热激90s，冰浴3分钟，加LB（不含AMP）400u&&37度孵育一小时，，
l取80ul涂平板，用了蓝白斑筛选，板长的挺好的&&但是挑了24个没有一个连接上的~已经做了几次了 不知道是哪里出了问题。。
另外，想问下载体和产物的比例是什么样比较合适~都是按实验室师兄师姐的体系加的不知道比例这回事，，
新手还望大家多多指教
先谢过了。。。
我也是新手，前段时间刚做了干扰载体的构建，我就实验过程是这样的
& && && && && &&&连接体系：PCR产物& &2ul
& && && && && && && && && && && &dd水& && &5ul
& && && && & 10*T4 ligase&&buffer& &&&1ul
& && && && && && && && && && && &载体& && &1ul
& && && && && && && && && && & T4连接酶 1ul
16度pcr仪过夜连接，感受态用的是全是金的trans-t1.全量连接产物加到感受态(10ul：50ul)冰浴半小时，42度热激60s，迅速冰浴2分钟，加LB（不含AMP）400u&&37度孵育2h,然后就涂板，结果很好，然后我又做酶切，测序验证，都没有问题。过程就是这样的，我只是把我的实验记录写下来了，你看看吧，希望对你有帮助，
不好意思，这个没有写清楚，，，连接产物与感受态的比例是 10：50& & 不明白的再交流哈。
你PCR 用的是什么酶？taq吗，要是别的酶的话查查需不需要加A ，TA克隆的话得有A
载体：19.8*载体大小/（1000*载体浓度）ul
片段：99*片段大小/（1000*片段浓度）ul
10*T4 buffer&&：& &1ul
补水到10ul
16度过夜。& && &
你的长得很好，没连上是指长的都是p-GEMT原质粒？这样就是没切好载体。
引用回帖:: Originally posted by hailey at
不好意思，这个没有写清楚，，，连接产物与感受态的比例是 10：50& & 不明白的再交流哈。 那你的目的片段是多大的呢&&我之前按这个方法做过800bp左右的 很好连上&&不知道现在是什么问题。。
引用回帖:: Originally posted by ltfe567 at
你PCR 用的是什么酶？taq吗，要是别的酶的话查查需不需要加A ，TA克隆的话得有A 这几次我用的是普通的 easy-taq酶~应该不会是这个问题的吧~
引用回帖:: Originally posted by 鬼羽帝魂 at
载体：19.8*载体大小/（1000*载体浓度）ul
片段：99*片段大小/（1000*片段浓度）ul
10*T4 buffer&&：& &1ul
补水到10ul
16度过夜。& && &
你的长得很好，没连上是指长的都是p-GEMT原质粒？这样 ... 是的 都是空载~请问没切好载体是什么意思？
24小时热帖
下载小木虫APP
与700万科研达人随时交流拒绝访问 | steamcn.com | 百度云加速
请打开cookies.
此网站 (steamcn.com) 的管理员禁止了您的访问。原因是您的访问包含了非浏览器特征(3f9d27b658c94394-ua98).
重新安装浏览器，或使用别的浏览器

我要回帖

更多关于 vr女友正式版闪退问题 的文章

 

随机推荐