肉种鸡锌营养对子代肉鸡免疫机能的影响及其分子机制--《中国农业大学》2015年博士论文
肉种鸡锌营养对子代肉鸡免疫机能的影响及其分子机制
【摘要】：本研究选用Ross-308肉鸡,通过五个试验研究了肉种鸡锌营养对子代肉鸡免疫机能的影响及其分子机制。
试验一旨在研究鸡胚以及新生的肉仔鸡发育进程中的表遗传模式。选用540枚Ross308种蛋进行孵化,在不同发育阶段的胚胎和出壳后的肉雏鸡中测定肝脏、胸肌和空肠的表遗传相关指标。结果表明,随着鸡胚的发育,DNA甲基化和H3K9乙酰化经历了肝脏中逐渐降低、空肠中N-形和胸肌中W-形的变化模式。H3K9的二甲基化、三甲基化和乙酰化表现为时间和组织依赖性的表达模式。在鸡胚出壳后,以上表遗传指标相对稳定。
试验二旨在探讨肉种鸡日粮中添加有机锌对子代肉鸡全身免疫以及肠黏膜免疫机能的影响。将45周龄雌性Ross308肉种鸡分别饲喂有机锌或无机锌0、50、300mg/kg6周后,收集种蛋并将出壳后的子代雏鸡分别饲喂含有20、70mg/kg锌的日粮。结果表明,种鸡低锌可降低蛋黄和新生子代血清的IgY、IgA、NDV、IBDV的浓度以及14日龄时外周血单核细胞的LPS刺激指数,这种效果可持续到35日龄。然而,肉种鸡日粮添加锌尤其是有机锌可显著改善这一效果。此外,母体饲喂高剂量有机锌可改善子代肉鸡的空肠形态,增加s1gA的分泌和杯状细胞的数量,提高黏蛋白Mucin2和锌指蛋白A20的表达、抑制NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的转录,同时上调PCNA的蛋白表达,下调Caspase3的蛋白表达,降低A20启动子区域的DNA甲基化但增加了组蛋白H3K9的乙酰化水平。相比子代肉鸡饲喂正常锌含量的日粮,子代肉鸡饲喂低锌日粮可显著降低淋巴器官指数、CD4+/CD8+比例、IBDV和NDV抗体滴度；上调炎性细胞因子的基因表达并下调A20的基因表达,降低A20H3K9的乙酰化水平。研究表明,肉种鸡日粮添加有机锌50-300mg/kg可通过改变A20的DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰抑制NF-κB通路的激活并增强子代肉鸡的肠黏膜免疫机能。
试验三旨在探讨肉种鸡锌营养能否改善子代肉鸡抵抗炎症反应的能力。选用试验二中各不同种鸡日粮处理组的子代雌性雏鸡,分成8组,饲喂正常锌含量(94.46mg/kg)的日粮,在子代肉鸡15日龄时对其腹腔注射LPS或生理盐水,检测连续注射LPS4次后的免疫机能。结果表明,LPS可显著降低肉仔鸡的体重、体增重和耗料量以及注射LPS后8和24h的血清IgA和IgG含量,提高脾脏指数,上调脾脏和空肠IL-8、IL-1β、TNF-α, NF-κBp65和A20的mRNA水平。肉种鸡日粮添加有机锌300mg/kg可显著提高子代肉仔鸡的血清IgA和IgG含量,抑制LPS诱导的脾脏和空肠NF-κBp65的转录以及炎性细胞因子的基因表达。研究表明,肉种鸡日粮添加有机锌300mg/kg可通过抑制NF-κB信号通路的活化缓解LPS诱导子代肉鸡的炎症反应。
试验四旨在研究种鸡锌营养对子代肉鸡免疫器官发育和肠黏膜屏障功能的影响。将雌性Ross308肉种鸡分别饲喂有机锌或无机锌0、100mg/kg8周后,收集种蛋并将出壳后的子代雏鸡饲喂低锌日粮(总的锌含量为5296mg/kg),并于15日龄时隔天注射LPS,连续注射4次。结果表明,种鸡日粮低锌可显著降低种鸡外周血T和B淋巴细胞的增殖,增加血清中IL-1β、IL-8的产量。肉种鸡饲喂有机锌日粮可促使更多的母源抗体转移到子代肉鸡的血液中,并改善子代雏鸡B淋巴细胞的增殖和凋亡,同时上调法氏囊PCNA的蛋白表达,下调Caspase-3的蛋白表达；增加脾脏T淋巴细胞的增殖、CD3和CD4的比例和PCNA的蛋白表达；同时,缓解LPS诱导的脾脏淋巴细胞NF-κB信号通路的激活以及炎性细胞因子的释放。肉种鸡低锌可导致子代肉鸡12日龄空肠绒毛高度/隐窝深度比值降低,PCNA蛋白表达下调；子代肉鸡LPS注射后体重降低,血清中DAO含量升高,直肠灌胃HRP后45min和120min血清中HRP含量升高,E-Cadherin蛋白在空肠上皮细胞的分布和表达异常；空肠组织IL-8、IL-1β、 TNF-α、 TLR-4、NF-κBp65的基因表达增加、A20的转录下降,IκBα的蛋白表达下调。肉种鸡日粮中添加100mg/kg的无机锌或有机锌可显著改善子代肉鸡在注射前后的肠道屏障和肠黏膜炎症反应,有机锌组在改善肠道屏障功能的效果好于无机锌组,但在改善肠黏膜免疫机能方面锌的来源无显著差异。研究表明,肉种鸡日粮中添加有机锌100mg/kg可显著增强子代肉鸡的体液和细胞免疫机能以及免疫器官的发育和肠道屏障功能。
试验五旨在验证锌指蛋白A20在锌调控鸡肠上皮细胞炎症反应的作用。通过对鸡肠上皮细胞感染A20基因RNA干扰病毒72h后,研究了锌缓解LPS诱导肠上皮细胞炎症反应的效果。结果发现,体外添加25μM锌可显著降低LPS诱导的促炎因子的产生。肠上皮细胞感染A20基因RNA干扰病毒后,A20的蛋白表达显著下调,IL-1β、IL-8、TNF-α的基因表达和蛋白分泌显著升高,同时加剧LPS诱导的LL-8、LL-印的转录上调和IL-1p、TNF-a的蛋白分泌增加。此外,相对于对照组,加锌可促进胞浆中A20和NF-κB p65的蛋白表达,并下调P-NF-κB p65的蛋白表达；然而提前进行A20基因沉默后,加锌并不能改善由于A20基因沉默导致的胞浆中20、 NF-κB p65蛋白表达下调和胞浆中P-NF-κBp65、P-IκBa蛋白表达上调以及胞核中P-NF-κB p65的蛋白表达升高。研究结果表明,锌可通过A20-NF-κB p65信号通路缓解LPS诱导的鸡肠上皮细胞炎症反应。
综上所述,肉种鸡日粮中添加蛋氨酸羟基类似物螯合锌300mg/kg可通过影响锌指蛋白A20基因的表遗传修饰促进子代雏鸡空肠锌指蛋白A20的基因表达,抑制LPS诱导的肠道炎症反应,增强肠黏膜免疫机能。相比无机锌组,肉种鸡日粮添加有机锌100mg/kg在改善子代雏鸡的免疫机能方面无显著差异,但可促进子代雏鸡的肠黏膜屏障功能。锌可通过上调A20的蛋白表达缓解LPS诱导鸡肠上皮细胞NF-κB信号通路的激活和炎症的产生；然而通过感染A20干扰病毒后,锌并不能发挥其抗炎的作用。因此,肉种鸡日粮添加有机锌增强子代肉鸡肠黏膜免疫机能是通过促进锌指蛋白A20的表达实现的。
【关键词】：
【学位授予单位】：中国农业大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2015【分类号】：S831.5【目录】：
摘要5-7Abstract7-10目录10-12缩略词（Abbreviations )12-13第一章 文献综述13-29 1 研究目的和意义13 2 国内外研究现状13-27 3 研究内容27-29第二章 试验研究29-115 试验一 胚胎发育后期以及出壳后雏鸡的表遗传模式分析29-45
1 材料与方法29-31
2 试验结果31-42
3 讨论42-44
4 结论44-45 试验二 肉种鸡锌营养对子代肉鸡免疫机能的影响45-77
1 材料和方法46-51
2 试验结果51-72
3 讨论72-76
4 结论76-77 试验三 肉种鸡锌营养对子代肉鸡抵抗炎症反应的影响77-88
1 材料和方法77-79
2 试验结果79-86
3 讨论86-87
4 结论87-88 试验四 肉种鸡锌营养对子代肉鸡免疫器官发育和肠黏膜屏障功能的影响88-106
1 材料与方法89-91
2 试验结果91-104
3 讨论104-105
4 结论105-106 试验五 锌缓解LPS诱导鸡肠上皮细胞炎症反应的分子机制106-115
1 材料与方法106-108
2 试验结果108-113
3 讨论113-114
4 结论114-115第三章 结论与建议115-116 1 主要结论115 2 创新点115 3 有待于进一步研宄和解决的问题115-116参考文献116-132附录132-146 附录1 染色体免疫共沉淀(ChIP)132-137 附录2 BSP测序137-141 附录3 荧光定量PCR141-143 附录4 鸡肠上皮细胞培养方法143-145 附录5 法氏囊、脾脏淋巴细胞的分离和淋巴细胞增殖反应145-146致谢146-147作者简历147-148
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京公网安备75号鸡源性枯草芽孢杆菌J-4对雏鸡生产性能和免疫功能的影响--《畜牧与兽医》2015年03期
鸡源性枯草芽孢杆菌J-4对雏鸡生产性能和免疫功能的影响
【摘要】：为了研究鸡源性枯草芽孢杆菌J-4对雏鸡生长性能和免疫功能的影响,将200只1日龄白羽鸡雏鸡随机分为两组,每组5个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.1%的枯草芽孢杆菌菌剂J-4(活菌含量为1.0×1010cfu·g-1),试验周期为42 d。分别在雏鸡7、14、21、28、35、42日龄时测定其周增重、周耗料量和料重比与免疫器官指数;抽取其外周血测定其T-淋巴细胞ANAE阳性率白细胞吞噬率。结果表明:试验组与对照组相比,试验期雏鸡的周增重均有所提高,分别提高了22.81%、33.15%、24.60%、11.18%、4.72%、9.79%;试验组雏鸡的免疫器官指数与绝对质量较对照组在不同程度上均有所提高;试验组T-淋巴细胞ANAE阳性率(28日龄时比对照组提高了14.22%,P0.05)和白细胞吞噬率(21和28日龄分别提高了24.07%,32.90%,P0.05)均有所提高。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：S831【正文快照】：
抗生素作为饲料添加剂已有几十年的历史,但饲料中长期使用抗生素,给人类健康带来了间接的威胁。随着人们对食品安全的重视,近年来益生菌作为绿色饲料添加剂在国内外迅速崛起。益生菌是由活体微生物制成的饲料添加剂,它无残留、不产生抗药性,能够解决抗生素带来的危害,已代替抗
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雏鸡预防球虫用什么药好啊？
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来自辽宁沈阳
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雏鸡14天，刚刚做完法氏囊免疫，之前发现有几处鸡的粪便是咖啡色，按我前一批饲养的经验，因为是同一家鸡场进的鸡雏，所以可能球虫病的基因还存在，前一批就大面积爆发球虫病，好多天才治过来，这次我想先进行防疫，不过因为鸡龄小，所以不知道用什么种类的球虫的药好，我现在有磺胺类的球虫药，不过是给大鸡做预防用的，不知道小鸡用什么？最好不伤肝肾的。因为兽药店有时为了买药爱虎弄人，所以还是在这里听听大家的意见比较可靠，毕竟这里都是养鸡的高手嘛！
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来自山东日照
用地克珠利，妥曲珠利。副作用小效果好。
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地克珠利和妥曲珠利属于什么种类的药物啊
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来自山东聊城
地克珠利属三嗪苯乙腈化台物
妥曲珠利属三嗪酮化合物
但在市面的销售渠道中很少有提到它的属性，你只知道是抗球虫的就可以了
凡是现实的都是合理的，凡是合理的都是现实，
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妥曲珠利最好在治疗时用，交替用克球粉，马杜拉霉素，尼卡巴嗪预防
选择本行业今生无悔！
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地克珠利就行，副作用小可加倍使用。
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预防用中药球虫散就行，不伤肝肾效果好。
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用地克朱利+青蒿，常山之类的就行了，马杜拉霉素毒性大。
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预防用地克珠利或者妥曲珠利效果不错。
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地克珠利+阿莫西林就行
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北海打鱼-南山放驴-昆仑牧马-五
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这两种都可以给小鸡用，放心！
北海打鱼-南山放驴-昆仑牧马-五洋捉鳖-拍扁栏杆-足登高台-神游洱海-御览九天
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用地克朱利+青蒿，常山之类的就行了，马杜拉霉素毒性大。
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引用第11楼梅香于 15:16发表的 :
用地克朱利+青蒿，常山之类的就行了，马杜拉霉素毒性大。 [url=/job.php?action=topost&tid=89607&pid=880255][/url]
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不用嫌拌料麻烦，用中药球虫散，配合肠道的中药连续用就可以有效防止球虫及肠炎的发生，前期可配合西药3天用完，qq：与你探讨
愿养殖朋友都挣钱
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