细胞自噬检测试剂盒流怎么检测

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-05-28 08:25 标签： mdc染色检测自噬
小木虫 --- 600万学术达人喜爱的学术科研平台
热门搜索：
&&自噬检测方面的问题
自噬检测方面的问题
大家好！我刚刚开始自噬方面的实验，请教大家：
我用不同浓度的药物，定性和定量检测24h时-Hela细胞自噬发生情况。根据文献的查阅情况，开始应用MDC染色在荧光显微镜下观察；另一方面用流式细胞仪定量检测MDC阳性比例。问题是：
1、最初两次荧光显微镜下检测，和对照组相比，给药组的荧光现象更明显，可是最近做总是看到一片淡绿色，看不到每个细胞的轮廓及荧光情况？
2、流式检测时，阳性Rapamycin对照总是不好，有时甚至和阴性图形类似？
我的怀疑是:
1、MDC染色方法操作处理中的问题。国内一些文献使用的方法不一，吖啶橙染的也不少。MDC有的用爬片，有的没用，具体写的不够详细。我没有使用爬片，给药24h后，PBS清洗，用MDC六孔板内染色孵育15min后直接进行的荧光镜检。因为前两次有比较明显的图，这样操作过程简单，觉得可以。可是，最近却观察不到了，而且流式的结果图，阳性总是不明显。
2、试剂。我按照文献和说明书处理的MDC和Rapamycin，终浓度0.05mmol/L和1umol/L，试剂使用前一天配置。
4、操作。流式上机之前，MDC孵育后处理就是清洗，消化，离心（2次），重悬，上机。
开始觉得挺简单的，荧光检测比较明显，就做了流式看看，但阳性参照却不明显，很纳闷。大家觉得是怎么回事，有什么建议么？
这问题我已经有一定的答案了
主要是MDC使用的问题，孵育时间可以适当延长；荧光显微镜调节不当。
另外，我们和别人的药物不同，引起自噬的程度不同，做出的结果自然不能完全参考别人文献的。
祝：实验顺利！
:hand:楼主，您好，能不能够发一下MDC使用的参考文献给我，我想知道一下MDC怎么配制及使用。
能用于切片吗，
学术必备与600万学术达人在线互动！
扫描下载送金币自噬的检测方法及评述--《现代生物医学进展》2012年09期
自噬的检测方法及评述
【摘要】：细胞自噬是广泛存在于真核细胞内的一种降解途径,在机体发育过程中、在生理和病理状况下都起重要作用。近年,自噬成为热点研究领域,但少有论文深入分析不同检测方法得来的数据在研究中的不同意义,说明不同检测方法所获的结果的优缺点和适用条件。本文拟对哺乳动物细胞自噬检测方法进行归类、介绍及评述,旨在为研究工作中自噬检测方法的选择和研究结果的解释起帮助作用。
【作者单位】：
【基金】：
【分类号】：R329【正文快照】：
前言细胞自噬是广泛存在于真核细胞内的一种溶酶体依赖的降解途径,胞内损伤的蛋白质和细胞器通过自噬作用被降解,产生的氨基酸、脂肪酸等降解产物再被细胞重新利用[1]。长因子缺乏、氧自由基、DNA损伤等应激皆可诱导自噬[2-4]。自噬是一个高度动态的过程,主要包括两个步骤:先
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式，仅支持PDF格式
【相似文献】
中国期刊全文数据库
任雅丽;李雪迎;王书合;柴立军;谢燕玲;程明;;[J];中国体视学与图像分析;2011年02期
黄勤欢;黄瑾;;[J];中国免疫学杂志;2007年06期
庄燕;贲晶晶;柏惠;陈琪;;[J];南京医科大学学报(自然科学版);2009年06期
朱娜;谭文杰;;[J];病毒学报;2010年06期
刘友斌;杨树森;樊瑛;甘润韬;;[J];中国病理生理杂志;2009年12期
杨恬;[J];第三军医大学学报;1985年02期
章晟;于长明;殷瑛;陈薇;;[J];军事医学科学院院刊;2009年05期
吴莉菊;[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;1986年04期
王慧俐;邱龄;李艳芳;;[J];山西医科大学学报;2010年04期
朴英杰;董武;霍霞;黄行许;乔东访;;[J];电子显微学报;1996年Z1期
中国重要会议论文全文数据库
叶明;乐美兆;李元敏;涂频;李桂梅;;[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年
张瑞祥;刘胜;;[A];第十次全国电子显微学会议论文集（Ⅰ）[C];1998年
中国博士学位论文全文数据库
魏欣;[D];华中科技大学;2009年
王炯;[D];安徽医科大学;2008年
荣明;[D];中国医科大学;2002年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993免费电话：（86）400-008-6094 (节假日均可接听)
业务部：（86）&&&&010-
人事部： 010-
行政部： 010-
&&&&北京安必奇生物科技有限公司成立于2006年，是由一批资深留学归国人员创办的研发服务公司，主要从事基因工程药物，尤其是单克隆抗体药物的基础研究、应用研究。2015年被科技部评为“高新技术企业”。随着公司的发展和越来越多的优秀人才的加入，逐渐发展成为了全球领先的以制药、生物技术开发等一系列全方位的实验室研发和研究生产为主的制药公司，服务范围贯穿从药物发现到实现生产的全过程。公司依托深厚的国际资源背景、经验丰富的留美科研人员致力于通过高性价比、高效率的研发服务帮助全球客户缩短药物研发周期、降低研发成本。
办公室地址：
中国北京市通州区科创东七街9号三楼
实验室地址：
北京经济技术开发区科创六街88号院3号楼9层
免费热线：
（86）400-008-6094
（86）&&&&010-
手机扫描微信二维码，了解更多公司服务，促销信息。
&&&&随着安必奇的持续快速发展，各种充满挑战但意义重大的工作机会将不断产生。公司为了能够吸引全国各地的优秀人才的加入，在北京、上海、天津、成都、西安和美国均设立有子公司，并将继续在全国各地(如深圳、武汉等城市)兴建子公司，最终做到公司布局全国化。公司拥有一批高素质、高学历的专业人才队伍，目前留学归国人才占公司总人数的20%以上......
您当前的位置：
细胞自噬检测服务
蛋白技术服务
抗体技术服务 +
+细胞技术服务 +
核酸技术服务 +
基础检测服务 +
产品展示 +
在线订购 Online Inquiry
*电子邮件：
*感兴趣的服务或产品
请输入"abace"作为验证码.
自噬（Autophagy），或称自体吞噬，是一个涉及到细胞自身结构通过溶酶体机制而被分解的过程，该过程是一个受到紧密调控的步骤，帮助细胞产物在合成、降解以及接下来的循环中保持一个平衡状态。“自噬”一词是由比利时化学家克里斯汀o德o迪夫在1963年创造的。90年代酵母的研究人员通过识别自噬相关基因，从而推动了自噬研究的开展。日本科学家大隅良典因对“细胞自噬机制的发现”，获得了2016年度的诺贝尔生理学或医学奖。在生物体内发育、分化、环境胁迫和肿瘤发生中具有重要的意义。
目前已有研究证明多种因素能够诱导细胞发生自噬，如饥饿、生长因子缺乏、微生物感染、细胞器损伤、蛋白质折叠错误或聚集、DNA损伤、放疗、化疗等。但是关于自噬信号的传递，现有的研究只明确了几种信号通路，包括抑制类和激活类，但具体的机制尚在研究中。
细胞接受自噬诱导信号后，在胞浆的某处形成一个扁平的类似“脂质体”样的膜结构，称为Phagophore。随着Phagophore不断延伸，将胞浆中的细胞器等成分，全部包裹住成为密闭的结构，称为“自噬体（autophagosome）”。自噬体形成后，可与溶酶体融合，自噬体中的内容物随即被降解，产物（氨基酸、脂肪酸等）被输送到胞浆中，供细胞重新利用，而残渣或被排出细胞外或滞留在胞浆中。
北京安必奇生物是美国Creative Bioarray公司的独家代理，拥有国际一流的研究人员组成的实验团队，依托国际化的先进技术及检测平台，能够为国内的科研工作者提供优质的细胞自噬检测服务。正常培养的细胞经自噬诱导剂或抑制剂干预后，即可对自噬过程进行观察和检测。安必奇生物能够提供的检测策略包括以下几种：
询价及订购
感谢您选择我公司的细胞自噬检测服务。如有任何相关的问题，请您联系我们的工作人员，我们即刻为您解答和服务。
手机扫描二维码
请扫描微信二维码，了解更多关于北京安必奇生物科技有限公司的信息。
免费电话：（86）400-008-6094 (节假日均可接听)
业务部：（86）&&&&010-
人事部：010-
行政部： 010-
办公室地址：中国北京市通州区科创东七街9号三楼
实验室地址：北京经济技术开发区科创六街88号院3号楼9层

我要回帖

更多关于 mdc染色检测自噬 的文章

 

随机推荐