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请问下核酸电泳和蛋白电泳到底有哪些区别? - 实验交流 - 生物秀
标题: 请问下核酸电泳和蛋白电泳到底有哪些区别?
摘要: [请问下核酸电泳和蛋白电泳到底有哪些区别?] 我们实验室是蛋白质组学(Proteomics)二维电泳实验室。使用的第二向电泳仪器是amersham的ettan dalt six。 现在我有意要做甲基化鉴定方面的实验,使用一种名为RLGS:restriction landmark genomic scanning method 限制性标记物全基因组扫描的技术 该技术的基本原理是先用限制性内切酶将基因切开后放射性同位素核苷酸标记,行一维电泳后,再 关键词:[电泳 核酸 蛋白电泳 实验室 二维电泳 限制性内切酶 蛋白质组学]……
我们实验室是蛋白质组学(Proteomics)二维电泳实验室。使用的第二向电泳仪器是amersham的ettan dalt six。 现在我有意要做甲基化鉴定方面的实验,使用一种名为RLGS:restriction landmark genomic scanning method.限制性标记物全基因组扫描的技术 该技术的基本原理是先用限制性内切酶将基因切开后放射性同位素核苷酸标记,行一维电泳后,再用另外一种限制性内切酶切割核酸后再做一次二维电泳。 请问是否有可能直接使用蛋白实验室的电泳仪做这种实验?
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刚进入实验室接触分子实验,今天做了个PCR,电泳图也不会看。哪位有教看电泳图的教程推荐一下,不胜感激
回答者:匿名用户
根据个人的经验和实验室的判断习惯,认为胶图主要能表示几个内容:
1. 片段大小。根据不同的胶浓度,目的片段的不同位置体现了大小的区别;胶浓度越高,孔径越小,片段跑得就越慢,小片段比大片段快。普通提取的质粒可以在溴酚蓝前方看到RNA带。可以用Marker指示大小,但是一般鉴定根据经验就可以大致判断。
2.DNA量。DNA量越大,嵌合的染料越多,看到的条带越亮,但是也要考虑碱基个数的差别,碱基越多嵌合的染料也越多,因此一般跑质粒1ul上样就有很明亮的条带了。若要定量,需做梯度稀释,一般认为稍微可分辨的条带大约是30ng。
3.DNA质量。如果质粒,或者特异的PCR,看到多余的条带,或者拖带,一片模糊的带,即表示PCR不特异,或者DNA降解了。
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其他回答 (1)
电泳时在中间加样孔加DNA Marker做对照,电泳结束后用 凝胶成像系统& 照相(需要调节曝光时间来调节条带的亮度,是条带相对清楚)。DNA Marker的说明书上会有相应位置条带的分子量参考值。也就是说位置与Marker相同的条带的分子量大小与改对应的Marker条带相同。如果条带很宽,有拖尾现象(拖的挺长)说明DNA有降解。如果条带弯曲,说明加样孔有杂质(不如说胶)。
回答者: 一级 一星助者
回答字数在10000字以内
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