花环夫人和志焕是谁

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-03-23 14:34 标签： 花环夫人
E花环实验_百度百科
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这是一种体外检测人和动物细胞免疫功能的方法，常用于计数。
E花环实验原理
上用来检测数量的一种实验方法，T细胞表面具有能与绵羊红细胞（SRBC）表面糖肽结合的受体，称为E受体（CD2）。CD2 是一种糖蛋白，相对分子质量为30 000～60 000，已证实E受体是人类T细胞所特有的表面标志。当T细胞与SRBC混合后，SRBC便粘附于T细胞表面，呈现花环状。通过花环形成检查T细胞的方法，称为E花环形成试验。根据花环形成的多少，可测知T细胞的数目，从而间接了解机体细胞免疫功能状态，判断疾病的预后，考核药物疗效等。[1]
E花环实验操作方法
1．用分层液密度梯度离心法分离淋巴细胞，计数后，用Hanks液配成107个/ml细胞悬液。
2．取0.1 ml淋巴细胞悬液，加入0.1 ml 1% SRBC及0.05 ml灭活小牛血清，混匀。
3．37℃静置5分钟，500 rpm低速离心5min后，放入冰箱，2小时或过夜。
4．取出试管，吸弃上清液，加0.8%戊二醛溶液1 滴，轻轻旋转混匀，置4℃冰箱固定15分钟。
5．取出后，轻轻旋转试管，使沉淀细胞重新悬浮；取1滴涂片，自然干燥后，瑞氏染色，高倍下观察。[1]
E花环实验结果判断
凡能结合3个SRBC者即为E花环阳性细胞。计数200个淋巴细胞，算出花环形成细胞百分率。[1]
E花环实验注意事项
1．SRBC最好是新鲜的，一般采血后保存在Alsever保存液中，2周内可以用，超过2周SRBC与淋巴细胞的结合能力下降。
2．从采血到测定，不得超过4小时，若用分离的淋巴细胞，放置时间也不得超过4小时，否则SRBC受体会自行脱落。同时用锥虫蓝检查活力，活细胞不少于95%。
3．计数前应将沉于管底的细胞予以重悬，但只宜轻缓旋转试管，使细胞团块松开即可，不能过猛或强力吹打，否则花环会消失或减少。
4．要求全部试验在室温（16～23℃）中进行。[1]
E花环实验实验材料
1．肝素抗凝血2 ml。
2．聚蔗糖-泛影葡胺分层液。
3．pH7.2～7.4 Hanks液。
4．瑞氏染色液。
5．0.8%戊二醛溶液（用Hanks液将戊二醛配成0.8%，然后用1 mol/L NaOH将pH调至7.2～7.4）。
6．吸收灭活的小牛血清（小牛血清经56℃ 30分钟灭活后，取1体积压积SRBC，加2体积灭活小牛血清，混匀后置37℃ 30分钟，离心沉淀红细胞，吸取上清，放4℃冰箱保存备用）。
7．1% SRBC悬液（无菌脱纤维的绵羊静脉血100 ml加Alsever保存液50 ml，置4℃冰箱保存，一般不宜超过2周。用前以Hanks液洗3次，1 500转/分 10分钟，弃上清，将压积红细胞用Hanks液配成1 %SRBC悬液，细胞浓度约为8×107个/ml）。[1]
E花环实验应用
可用于外周血T细胞数量、功能的检测及T细胞的分离。[1]
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