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&&WB结果膜总是黑成一片是怎么回事
WB结果膜总是黑成一片是怎么回事
做WB整整有一个月了,结果都不好,主要是条带颜色淡,背景颜色深,有时甚至是整个黑成一片,根本看不到条带的影子,很是恼火。有尝试过换封闭液,增加封闭时间,增加洗膜次数,可结果依旧不好。现在的条件是5%的脱脂奶粉(光明),一抗孵育过夜,洗膜(TBST:Nacl 8.8g,1M PH7.5 Tris HCL 20ml,Tween 20 1ml,蒸馏水定容至1L)5min*5次,二抗孵育1h,请教给位大神,我的问题到底出在哪儿,是操作中还是真的是抗体不行呢?
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刚开始用的蒸馏水,后来嫌麻烦,就换成蒸馏水了
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