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11444.com - Wenxin Guizhou Sheng China
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11444.com - 11444 IP lookup [IP：58.82.238.195]
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CityWenxin
Province/StateGuizhou Sheng
Country/AreaChina
ContinentAsia
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(正式写手)
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激光共聚焦显微镜观察微生物菌落具体怎么操作？已有1人参与
吸附到载玻片的微生物菌落，用共聚焦观察，通用的切片怎么做哈？求大家给点参考建议，谢谢啦，站内联系也行。
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(小有名气)
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湿态直接染色就行，完了用封片液封片，再用树胶封一下保存就行，很简单
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(正式写手)
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虫号: 895537
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
关键看你要看什么
------------------------------------------------------------
(正式写手)
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虫号: 680549
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引用回帖:: Originally posted by quiller2000 at
关键看你要看什么
------------------------------------------------------------ 就是想通过共聚焦观察得到微生物菌落中的诸如蛋白，多糖这些的分布情况，以前没接触过，恳请帮忙
(正式写手)
在线: 159.7小时
虫号: 895537
注册: 性别: GG专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
★ zhang8826857: 金币+1, 欢迎交流^_^
如果你想观察的是细胞间的物质，而且是出于菌落中的，那你不需要用confocal,可以看看用多糖的染料或特异性的蛋白质的染料染色后，用解剖镜或正置看看。confocal一般是倒置的，要求你必须做片子，而你的材料用一压，一定就变形了。看不到你所需要的菌落状态下细胞-细胞间的物质的分布和丰度。
另外，你要考虑染料或者探针的问题。PS，为什么不直接分离呢？
(正式写手)
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虫号: 499507
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【答案】应助回帖
★ 感谢参与，应助指数 +1zhang8826857: 金币+1, 欢迎交流^_^
如果看单个菌细胞，可以不做切片，培养后直接固定，透化，染色
如果看菌落之间的和单个细胞的东西，那得要像普通的免疫组化一样做
Intheway,Onmyway
(正式写手)
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虫号: 680549
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引用回帖:: Originally posted by yushenye at
如果看单个菌细胞，可以不做切片，培养后直接固定，透化，染色
如果看菌落之间的和单个细胞的东西，那得要像普通的免疫组化一样做 我想观察水处理中微生物生物膜的物质分布，大概膜厚大几十到一百个微米，通过染色观察蛋白质，多糖这些分布情况，微生物生长在载玻片上形成生物膜。其实想做切片的目的是我怕生物膜比较厚的话下层物质很难被探针标记到，我主要是想通过观察得到物质分布的三维结构，通过构建生物膜的一个立体的结构，得到他的空隙分布情况。针对我这种情况，您能给我一个从取样到上镜一系列过程的参考吗？多谢啦！我不是学这方面的，只是想得到分布结果所以前面的不得不去做，还请您多耐心的帮助.
(小有名气)
在线: 94.1小时
虫号: 1380602
注册: 专业: 环境工程
楼主找到方法了吗？
我做与你相关的，也在找方法，我觉得应该固定一下，不然跟有虫友说的用盖玻片一盖 生物膜就被压了 结构就破坏了
另外怎么能看到三维结构呢？
(正式写手)
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虫号: 680549
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送鲜花一朵
引用回帖:: Originally posted by jiacunzhen at
湿态直接染色就行，完了用封片液封片，再用树胶封一下保存就行，很简单 谢谢
(正式写手)
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【答案】应助回帖
引用回帖:: Originally posted by 成龙 at
我想观察水处理中微生物生物膜的物质分布，大概膜厚大几十到一百个微米，通过染色观察蛋白质，多糖这些分布情况，微生物生长在载玻片上形成生物膜。其实想做切片的目的是我怕生物膜比较厚的话下层物质很难被探针标 ... 呵呵，其实你以“细菌”“生物膜”“免疫荧光”来搜索英文文献，应该可以找到，试试吧，
不行再问我
Intheway,Onmyway
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还没有宝宝
HCG是39.1miu/ml，未查孕酮，这样的结果偏低吗？
10月20日查出我的HCG是39.1miu/ml，未查孕酮。
9月10日末次，排卵较晚。10月14日在家里用早孕试纸查，没有查出。19日又查，查出非常淡的水印。
现在感觉HCG有些低我有些担心。因为昨天有事，医生让24日再去验血检查一下。
大家觉得这个结果好吗？
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320li时尚提车详细流程重磅多图呕心沥血码字但求交流
[点击：11452 / 回复：2]
楼主#发表于： 11:38:06 |
首先说明，请斑竹大人原谅，这篇提车文已经发过一次，但是由于不了解规则，图片上少了点，只被推荐没被射精，关注的人寥寥。但我相信，我是很用心地写了很多文字，可供论坛大大们参考交流批判，所以修改再发并配多图，请求加精，如有违规，请原谅。 &&&&&3月18日新上小三320Li时尚版，加装导航及倒车影像，开米士银米内。提车半月有余，一直没有时间上作业，今天简单记个流水账，说一下入手流程和使用感受，与论坛兄弟分享，同时求认证。图片基本都差不多，所以拍了不少，但不上那么多了，主要是文字的东西。&&& && 自家的本田思域开了六年多，说起来还真是有感情，没出过什么大问题，使用经济，保养油耗都花费不多，当年入手时外观内饰都堪称惊艳，驾驶的感觉不错，油门刹车轻盈，分层式仪表盘都成了经典，关键是没有什么小毛病，人性化设计十足，媳妇和我都没有意见，综合评分8分，就是配置太低，空间略小，还担了小日本车的名声，在钓鱼岛、9.18这种时候抬不起头。郑重声明，楼主不是日托，是直观的用车感受。随着宝贝闺女上学，媳妇上班远要用车，一天四次接送成了大问题，老爸的车又不能经常蹭，再上一辆新车提上日程，于是开始了纠结的选车历程。因为有套新房刚付款，加上装修，再加上一笔计划内的款项还没到位，资金骤然紧张，购车预算也不算充足，刚开始考虑25万左右的中级车。首先排除掉众矢之的的日系，没办法，这几年因为开本田饱受攻击，个人也觉得再高调用日货于情于理都说不过去；韩系不考虑，原因众所周知；法系的508、C5没感觉不上眼；美系君越体格太大，君威空间太小，迈瑞宝太中庸，油耗、操控，淘汰；Suv，这个可以有，媳妇力主，但是这个价位的SUV，砍掉CRV，砍掉Rav4（其实换代的Crv外观太丑，完全跟上代天壤之别；换代的新Rav4倒是漂亮，内饰又提高，造型也有个性）；保养、内装、便捷度等原因，淘汰雷诺科雷傲、森林人、欧蓝德等，也就剩途观和翼虎，媳妇一句话，不喜欢，原因不明，over，咱就得干瞪眼。不好意思，还有一众自主，潜意识里就pass了。总之，阅车无数后，剩下的自然是大众神车，迈腾商务味太浓，能接受的就只剩新帕。偏偏一哥们刚置入香槟金新帕，还就是我最喜欢的颜色，得，咱让了吧，别弄个双胞胎摆造型了。这日子还得过不是，一横心，提高预算，再从老爸那争取些支援，直奔35来了，这就不可免俗地变成了3系、A4、CC、C级和S60五选一，C级面临改款，S60无亮点且本地无4S,首先淘汰。&&&&&& 去年七月起，开始在一汽大众、奥迪和宝马4S来回奔走试乘试驾，CC2.0T尊贵版造型惊艳，做工用料不俗，性能尚可，试驾专员炫耀般尝试加速、刹停、S弯、180度调头，就差没漂移，总体印象不错，差在后排空间不是一般的小，膝部头部都没有余裕，买车总不能越买越小吧，浪费了大车身和流线造型，优惠也拿不出手，忍痛拿掉。补充一句，一汽大众的销售实在牛，问什么话都是目光游移，轻描淡写，眉宇间说不出的清高傲气，靠，哥来这是找刺激来了，卖个所谓“神车”还真把自己卖成大爷了，得了，电话也不留，闪人！A4和3系，永远的对手，我来了。其实说起来，奥迪店只是到里边看了看，甚至没有试驾，就因为在打开车门的一刹，瞬间泪奔：跟这几年一直在用的09款A6一样一样的内饰，一样一样的布局，那中控，那座椅，那天窗，那挡把，我是来买新车吗？？？剩下的没得选了，就剩3了。以前坐过7，开过几次朋友的530、525，车是人家的车，再好也没感觉。第一次试乘小3，急加速和刹停表现劲爆，基本让我拿定了主意，再加上这辆车主要家用，后排无敌空间倍有面子，没悬念，长轴版。最不满意的是时尚款配置实在寒酸，只能自己加钱加装导航倒车影像，这是面子，没办法。其实说了这么多，关键只有一个：喜欢，对上了眼缘，一年多以前刚在《汽车杂志》看到评测文章和有限的几张配图就萌生了占有欲，一旦拥有，别无所求，所以前文所述的这么多选项所谓周折纠结基本就是一闪而过，A4根本没上路试驾，CC也只到店加试驾两次，其他的多数是纸上谈兵。3系的优缺点都十分明显，毫不折衷，喜欢可以把她捧到云端，不喜欢也可以把她踩到地下，但是，在当前的条件水准和审美水平上，至少这是一次完全自主自愿加上些许优越感的选择。&&&&&& 和销售的交涉堪称漫长曲折，最主要是年前资金没到位，销售满面春风焦急迫切地联系了几番，但凡店庆、十一、车展、元旦必然是短信电话齐至，当然最主要是价格上毫不妥协，所以哥哥都没积极回应，慢慢就丧失了热情。中间过程不一一细表，正月过后，我也没有了讲价磨嘴皮的耐心，最后优惠13p多拿下，加装带质保原厂导航加倒车影像再掏1w，店内上保险走电销价73折，加上找朋友，赠送全车量子贴膜、全车镀膜、底盘装甲，基本符合预期目标，没办法，小城市优惠幅度没法和京上广比，认了。车身颜色是我喜欢的，内饰就因为带老爸去了一次4s，老头不喜欢黑色，拍板定了米，我的心拔凉拔凉的，超级不耐脏，还大俗，跟我的思域坐进去一个感觉，无语！提车后主要开窗晾味，目前跑了500不到，还在等牌，一些粗浅的用车感受说来听听。&&&&&& 先说不满意的，多数是共性：&&&&&& 1、车内置物空间太少，储物柜实用性太差，除了前后排杯架，就没用能放东西的整地儿，连两个cd包也只能塞进副驾前储物箱，门把手里边就是纯摆设，这点小日本真他妈强悍，你想到想不到，他都设计得出来，需要向人家学习；&&&&&& 2、内设用料塑料感太浓，没用质感，连形象工程也没有，宝马实在是太自信了，貌似比进口三系手感也差些，虽说是乞丐性，但30多万的车跟人家雅阁、君越之类中配以上车型有明显差距，让车主虚荣心强烈受挫，批一个；&&&&& 3、车内暴晒加通风加活性炭加水醋加水果若干方式去味，新车味还是比较大，特别是偶尔看到天窗滑轨上的黄胶，外观那叫一个粗劣，味道那叫一个刺鼻；&&&&& 4、屏幕太小了点，跟5系的宽屏加16：9没法比；导航的版本不知道是哪一版，有些地标看不到。&&&&& 5、车钥匙超普通，没个性，没手感，磨砂处理得象淘宝货；&&&&& 6、外后视镜手动，太太太太太低调了吧？&&&&& 7、胎噪大，发动机冷启动那一声怒吼惊醒了多少路人的清梦。&&&&&& 当然，缺点再多，只要真心喜欢，也可以选择性忽略。再说满意的：&&&&&& 1、品牌，不说了，从小心中遥不可及的梦，每次开车看着方向盘中间的车标都很陶醉意淫。30多万的宝马和40、50万的奥迪，关注度、回头率高的铁定是宝马有木有？声明一下，楼主今年本命年，可惜是老马，36接近奔四的的年龄，岁月催人老，用小马装嫩有木有？在论坛谁能有我老，铁定的老大哥有木有？风度、气质、内涵、激情、萌酷帅富，统统跟我无关有没有？筒子们，给哥来点掌声鼓励。&&&& &2、外观设计，特别是腰身流线，车头灵动，车尾典雅，设计完成度极高，见过的朋友都说漂亮；&&&& &3、天使眼头灯，聚光度、光色，大爱；&&&& &4、后排空间不次于A6，有面儿，家用商务都够范儿；&&&&& 5、油耗10个多一点，不错，意料之外；&&&&& 6、驾驶操控，这是一辆车的本质。方向盘适中，转向比适中，握感扎实，驾驶转向侧倾小，支撑力好，提速渐进，动力稳健有余裕，变速箱的功力在，偶尔在宽阔路面搞个S弯或急转调头，没有失控感，紧急刹停够有力度，sport模式、激烈提速高转速尚未尝试。&&&& 以上林林总总说了这么多，历时两天半，最近刚刚又跑了次高速，可以用稳健形容，谈不上咆哮的动力，sport模式方向盘变重，变道精准，但还没敢深度尝试。&&&好了，文字结束， 求认证，求加精，求点赞，求指教。下面上图。
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华晨宝马还没抠掉，华晨太悲催了
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