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熊胆粉的质量标准研究
熊胆粉为熊科动物黑熊经胆囊手术引流胆汁而得的干燥品，居我国四大名贵动物药之首，具有清热解毒、保肝利胆、去翳明目等功效，素有“药中黄金”的美誉，可用于肝胆、眼部及心脑血管疾病的治疗。然而，由于药源稀缺，加之国内外动物保护组织对猎熊割胆的强烈谴责，一度使天然熊胆的生产和发展举步维艰。如今活熊引流取胆技术的成功，实现了熊胆粉较大规模量产，暂时缓解了野生动物资源与临床用药之间的矛盾，但仍然无法满足日益增长的市场需求，这就使得市售熊胆粉品质良莠不齐，甚至出现用廉价胆汁替代熊胆的现象，严重影响了熊胆制剂的临床疗效与用药安全，因此对其质量的全面控制亦显得尤为重要。近年来，虽然熊胆粉的质量标准在逐步完善，但其质量控制指标仍比较单一，仍需建立熊胆粉多成分、多技术同时监测的更全面的质量评价体系。本课题在熊胆粉1996版《部颁标准》的基础上，对其薄层鉴别和含量测定的指标与方法进行了改进与优化，增加了熊胆粉的UPLC-MS指纹图谱分析，并利用多种现代分析技术，对不同动物胆汁中胆汁酸类成分进行了差异比较，为熊胆粉的真伪优劣鉴别提供科学依据。　　1.针对熊胆粉现行质量标准的不完善，本研究采用多种分析方法对其进行定性鉴别，以牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)、牛磺胆酸(TCA)、甘氨熊去氧胆酸(GUDCA)、甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA)、熊去氧胆酸(UDCA)、鹅去氧胆酸(CDCA)7个胆汁酸为指标成分，首次建立反相薄层色谱分析方法，并利用HPLC-ELSD对指标性成分牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)和牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)进行含量测定，参照熊胆粉《部颁标准》对其进行水分测定、糖检识、异性有机物检测。熊胆粉的RP-TLC鉴别方法简便，分离度好;HPLC-ELSD和UPLC-MS指纹图谱相似度高;TUDCA含量为27.14-38.18％（平均31.62％），TCDCA含量为22.71-38.26％（平均28.48％），TUDCA/TCDCA的平均配比为1.15;水分为5.43％-7.52％（平均6.98％）;所有熊胆粉样品中均未检测出糖分、植物组织或动物组织等异性有机物。　　2.为比较不同动物胆汁中胆汁酸类成分的差异，本研究综合利用RP-TLC、HPLC-ELSD、UPLC-MS三种分析技术和方法，定性和定量地对熊胆、鸡胆、鸭胆、猪胆中胆汁酸类成分进行了差异分析。熊胆中主要含有TUDCA、TCA、TCDCA、UDCA和CDCA，其中TUDCA和UDCA是其特有胆汁酸;鸡胆主要含有TCA、TCDCA、CA、CDCA;鸭胆中主要有TLCA、TCDCA、CDCA;猪胆中主要含有THDCA、GCDCA、TCDCA、HDCA，其中THDCA和HDCA是其特有成分，GCDCA在猪胆中含量很高，其他三个胆汁不含或仅含微量，因此GCDCA也可作为猪胆的特征性胆汁酸。三种分析方法优势互补，其检测结果基本一致，能通过胆汁酸的差异，实现四个动物胆汁的区分，保障熊胆粉质量。　　3.本文运用离子阱质谱对16个游离型和结合型胆汁酸的质谱裂解行为进行了初步探究。结果显示，游离型和结合型胆汁酸的ESI-MS/MS裂解方式相似，主要是中性丢失H2O、CO2、CO、甘氨酸、牛磺酸取代基以及发生侧链断裂等。当给予相同碰撞能量时，通过比较二级质谱谱图中碎片离子的类型和丰度，可区分同分异构胆汁酸，实现其快速质谱鉴别。
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R282.740.3
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HPLC法测定牛磺熊去氧胆酸含量
HPLC 法测定牛磺熊去氧胆酸含量 摘要： 目的 采用反相高效液相色谱法测定牛磺熊去氧胆酸的含量。方法用 Welchrom C18 （250mm× 4.6mm，5μm）柱为分析柱，乙腈：缓冲液（磷酸二氢 钾与庚烷磺酸钠混合溶液） （37：63，V/V）为流动相；检测波长为 210nm。结 果最低检出限为 0.3ng，定量限为 1ng；线性范围 0.01～0.75mg/ml （r=0.9999） ； 重复性实验 RSD 为 1.1%。结论本方法准确、简便，可用于测定牛磺熊去氧胆酸 的含量。 关键词：牛磺熊去氧胆酸 含量 牛磺鹅去氧胆酸 牛磺熊去氧胆酸（Tauroursodeoxycholic Acid，C26H45NO6S.2H2O）是最新 的第三代口服胆汁酸， 是熊去氧胆酸与牛磺酸的共轭体，其亲水性较熊去氧胆酸 高，溶石速度更快，全部溶解率提高，安全性更好。其含量测定方法多采用酸碱 滴定法，但误差较大，文献报道中也有采用 HPLC 法测定含量的，但基本上都是 采用甲醇与磷酸盐的混合溶液作为流动相， 该方法存在重现性不够好且峰形较差 的缺点，我们通过实验，对检测方法进行改进，获得了较好的效果。 1、仪器及试药 日本岛津 LC-10A 液相色谱仪（ SPD-10A VP Plus UV-VIS 检测器） ； TU-1800SPC 紫外分光光度计（北京普析通用仪器公司） 。 磷酸二氧钾、庚烷磺酸钠、盐酸、氢氧化钠、双氧水等均为 AR 级； 甲醇 为色谱级。牛磺熊去氧胆酸钠对照品（中国药品生物制品检定所，批号 507，含量 100%，供含量测定用） ；牛磺熊去氧胆酸工作对照品（本 公司提供 TAU091229 ） ；牛磺熊去氧胆酸样品（本公司提供 TAU091222 ， TAU091223，TAU091228） ；牛磺熊去氧胆酸（东京化成工业株式会社，试药， Lot.GD31 ） ；牛磺鹅去氧胆酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号 405） 。 2、方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：Welchrom C18（250mm× 4.6mm，5μm）柱为分析柱，乙腈：缓冲 液 （取磷酸二氢钾 3.4g， 庚烷磺酸钠 0.506g， 加水至 500ml， 混匀） =37： 63 （V/V） 为流动相；检测波长为 210nm。 2.2 色谱条件的选择 2.2.1 检测波长及流动相的选择 通过对牛磺熊去氧胆酸的水溶液紫外测定，发现其只有末端吸收，仪器噪音 水平高，灵敏度较低，为了保证检测灵敏度同时避免噪声的干扰，选择 210nm 为检测波长。采用乙腈：缓冲液（取磷酸二氢钾 3.4g，庚烷磺酸钠 0.506g，加水 至 500ml，混匀）=37：63（V/V）为流动相，出峰时间合适，峰形好。 （图 1） A 牛磺熊去氧胆酸钠（中检所） B 牛磺熊去氧胆酸（日本） C 牛磺熊去氧胆酸工作对照品 D 牛磺鹅去氧胆酸（中检所） 图 1 样品色谱图 2.2.2 专属性考察 取本品 100mg 置于 10ml 容量瓶中， 加流动相稀释至刻度， 作为贮备液备用。
酸破坏试验 移取储备液 1.0ml 至 10ml 容量瓶中，加 1M HCl 1.0ml 于 80℃水浴上反应 2hrs 后，加 1M NaOH 1.0ml 中和，加流动相至刻度，即得。主峰能与杂质及降 解产物完全分离。 碱破坏试验 移取储备液 1.0ml 至 10ml 容量瓶中，加 1M NaOH 1.0ml，于 80℃水浴上反 应 2hrs 后，加 1M HCl 1.0
方法 采用薄层色谱法鉴别制剂中的熊胆 粉、茵陈、白术、甘草。采用高效液相色谱法测定制剂中牛磺熊去氧胆酸钠的含量。色谱柱: Kromail 100-5 C18 (4.6 m...比值 在[含量测定]项中,牛磺熊去氧胆酸含量与牛磺鹅去氧胆 酸含量之比值不得...水分 取本品约 2.0g,精密称定,照水分测定法(《中国药典》 一部附录Ⅸ H 第...测定法 精密吸取对照品溶液 10ul 与供试品溶液 5～10ul(视含量高低),注入液 相色谱仪,测定,即得。 本品按干燥品计算,含牛磺熊去氧胆酸(C26H45NO8S)不得...牛磺熊去氧胆酸 色谱 HPLC 液相色谱 液相色谱图 液相分析 检测 隐藏&& 牛黄熊去氧胆酸的测定 熊去氧胆酸的测定 色谱条件: 色谱柱:(月旭科技提供) www.welchmat...牛磺酸含量测定方法_药学_医药卫生_专业资料。牛磺酸含量测定方法 1.牛磺酸提取 1.1 前期处理将原料洗净,称取 50g, 按 1∶3 加入蒸馏水, 匀浆并调 pH 为 ...熊去氧胆酸_药学_医药卫生_专业资料。熊去氧胆酸【药品名称】 通用名称:熊去氧胆酸 英文名称:Ursodeoxycholic Acid 【成份】 本品主要成份为:熊去氧胆酸。其化学...年牛磺熊去氧胆酸产业市场发展及前景预测研究报告_调查/报告_表格/模板_实用文档。中金企信(北京)国际信息咨询有限公司―国统调查报告网
年...[8]赵勇,秦艽.地上部分化学成分的研究熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸钠和牛磺鹅去氧胆酸 钠的分离与含量测定[d].西北大学,2005. *通讯作者:崔正云。 ...国家 部颁标准规定,熊胆粉中主要有效成份牛磺熊去氧胆酸含量不得低于 23%。性...用此法,分春秋两季,一年服用熊胆粉 20～30 克, 坚持就可根治关节炎、产后...中和滴定法 应用范围:该方法采用中和滴定法测定熊去氧胆酸(C24H40O4)的含量...牛磺熊去氧胆酸的合成 暂无评价 2页 ¥2.00 熊去氧胆酸胶囊溶出度测... ...
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高效液相色谱法测定熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸含量
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高效液相色谱法测定熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸含量
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3秒自动关闭窗口优思弗的熊去氧胆酸真的就比归真堂的熊胆粉贵吗？别吹牛了！
　　最近，关于归真堂活熊取胆的事件闹得沸沸扬扬，各家之言也纷纷涌现，基本上把该说的都说了。然而，今天看到了一条貌似很火的状态，这条状态是这样的&源自某财经报刊：世界上人工合成熊去氧胆酸的主要生产厂商Losan　Pharma　GmbH位于德国，其产品&优思弗&正是熊胆粉的替代药物&熊去氧胆酸&的知名品牌。优思弗熊去氧胆酸价格为6.25毫克售价235元人民币（约折合37600元/克），而归真堂的熊胆粉价格为188元/克。此次围攻归真堂的急先锋，AAF(亚洲动物基金)，曾在2月23日的媒体沟通会上公开表示该组织接受过德国企业的捐赠，却不肯公布具体捐赠名单。中国有句老话，无利不起早，AAF这么些年来全力围剿中国熊胆采集业，其目的恐怕不仅仅是动物拯救这么简单吧&&
&&&&&&& 这条状态开头是&源自某财经报刊&，我查了一下，网上关于这段话的全部信息来源均指向了《经济观察网》，所以此处所说的&某财经报刊&应该就是《经济观察网》无误。（经济观察网原文地址.cn/1397.shtml）而这条状态中对归真堂最有利的证据莫过于优思弗熊去氧胆酸要37600元/克，而归真堂的熊胆粉只要188元/克。对此，本人专门查了一下优思弗熊去氧胆酸的价格，249元一盒（25粒/盒，250mg/粒装，详情见 /DrugDetails_.shtml）。那么我们就可以算一下了，一盒优思弗熊去氧胆酸中熊去氧胆酸的质量为25&250mg=6250mg，而1g=1000mg，所以一盒优思弗熊去氧胆酸中熊去氧胆酸的质量为6.25g，再用249&6.25=39.84元/克。
&&&&&&& 哎呀，怎么只有39.84元/克呢，原文中不是说高达37600元/克吗？细心的读者肯定已经发现了，原文中写的是6.25mg，售价为235元人民币，而本人通过实际收集资料证据，得到的结果是6.25g的售价为249元。6.25mg与6.25g之间相差1000倍，因此，我们可以得到结论，要么是《经济观察网》的这位记者同学小学数学不过关，要么就是这位记者在故意抹黑优思弗。而其它各大网站的转载编辑，也没有尽到自己的责任，没去查证原始数据，就一刀切转载，误导网民。
&&&&&&& 有人说了，你只查优思弗的价格，怎么不去查归真堂熊胆粉的价格呢，有可能归真堂熊胆粉的价格也错了呢，说不定正确价格还是比优思弗低呢。这个我当然查了，归真堂熊胆粉的价格为188元一盒（4瓶/盒，0.25g/瓶，详情见 /DrugDetails_.shtml）。算完可知，归真堂的熊胆粉的确为188元/克，与原文无误。
&&&&&&& 由此可见，说优思弗的熊去氧胆酸比归真堂的熊胆粉贵，纯属谣言。
&&&&&&& 而且，熊胆粉中的有效成分牛磺熊去氧胆酸，国家标准规定的是不少于23%，如果按此最低标准去换算归真堂的熊胆粉中纯牛磺熊去氧胆酸的价格，则高达817.39元/克！而优思弗熊去氧胆酸中熊去氧胆酸含量的标准为不少于99.1%，用最低标准换算一下，则为40.20元/克！
&&&&&&& 到底是谁贵谁便宜，一目了然。
&&&&&&& 而这条状态中透露出的浓浓的阴谋论气息，我们先按下不表，以后再说，今天就先写到这里了。
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品评校花校草，体验校园广场[发明专利]一种人工熊胆粉及其制备方法有效
申请/专利权人：
公开/公告号：CNB
发明/设计人：;;;;;;
公开/公告日：
主分类号：
分类号：;;;
搜索关键词：
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海凯宝药业股份有限公司，未经上海凯宝药业股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【】
【说明书】：
技术领域本发明属于药物领域，特别涉及一种人工熊胆粉及其制备方法。背景技术熊胆，由熊科动物黑熊或棕熊干燥胆囊胆汁得到，具有清热、平肝、明目的功效，其主要成分是牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)。熊胆是四大名贵动物药之一，有2000余年的入药历史，有大量的处方都含有熊胆成分。我国每年熊胆粉产量约30吨，仍然满足不了人类健康的需求。目前高端熊胆粉供需矛盾的日益突出和低端原料用熊胆粉市场需求的持续增加，使得熊胆粉的价格节节攀升，市场价格已经超过了5000元/kg。更为严峻的是，国内外动物保护组织对活熊取胆的长期抵制，特别是最近的“归真堂”事件再次引起了国际国内社会的广泛关注，给国内熊胆粉的生产和相关产业的发展带来了前所未有的阻力。因此，加快人工熊胆的研发，促进熊胆产业可持续发展已经提上了议事日程。但与同属珍稀动物用药的麝香和牛黄不同，迄今为止，我国的“人工熊胆”尚未获得国家药监局的新药批准。根据目前检索的专利文献，涉及人工熊胆的制备方法主要包括以下几方面：(1)中国专利CN.6(人工熊胆粉的合成新技术)中，公开了以来源广泛，价格低廉的禽胆为基础原料，经物理方法分离去除蛋白质、多糖、脂类杂质成分，保留与天然熊胆粉相似的活性成分，再添加一定量熊胆特有的牛磺熊去氧胆酸、氨基酸、微量元素等。(2)中国专利CN(人工熊胆)中，公开了以牛黄熊去氧胆酸钠、鸡胆膏、胆红素为原料制备的人工熊胆。(3)中国专利CN(人造熊胆粉的制备方法)，用禽胆汁在强氧化剂和还原剂的作用下，将胆汁中的牛磺鹅去氧胆酸转化成牛磺熊去氧胆酸，然后添加胆汁色素、胆汁酸成分，加工配制成人造熊胆粉。(4)中国专利CN(人工熊胆及其制造方法)，将牛磺熊去氧胆酸钠、混合胆素、多种氨基酸、矿质元素、米糠油、胆固醇、卵磷脂等混合通过一定工艺，制成人工熊胆。(5)中国专利CN.2(人工熊胆)，利用兔胆、鸡胆、鸭胆、鹅胆混合而成制成人工熊胆。但牛磺熊去氧胆酸含量达不到药典标准。(6)中国专利CN.4(人工熊胆)，将禽胆汁中的一种或几种的混合物、和牛胆汁、羊胆汁、兔胆汁、狗胆汁中的一种或几种的混合物与化学合成的牛磺熊去氧胆酸混合而制成人工熊胆。(7)中国专利CN.6(一种人工熊胆粉及其制备方法)，以禽胆为原料，加入牛黄熊去氧胆酸钠制备而成。目前技术制备出的人工熊胆仍然存在问题，有的技术仅仅将不同禽畜胆汁混合在一起而制成的产品的牛磺熊去氧胆酸的含量根本无法达到药典的标准。很多技术是在禽畜胆汁混合物的基础上添加了一些化学物质比如牛磺熊去氧胆酸、胆色素、氨基酸等以使制成品的化学成分与天然熊胆粉的成分相似，但无法真正成为熊胆替代品。所以为了克服现有人工熊胆制备技术缺陷，有必要提出一种新的人工熊胆制备方法，在不添加其他化学成分的前提下，将禽畜胆汁体外模拟生物催化转化，并通过一定工艺制成人工熊胆，使其成分与天然熊胆化学等值。发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种人工熊胆粉及其制备方法，将禽畜胆粉通过体外模拟生物催化转化制取人工熊胆粉，使其成分与天然熊胆化学等值。本发明为解决上述技术问题而采用的技术方案是提供一种人工熊胆粉的制备方法，包括如下步骤：a)将禽畜胆粉用pH＝7～9的缓冲液溶解后进行过滤，得到滤渣和滤液；b)将所述滤液加入装有7α-羟基类固醇脱氢酶、7β-羟基类固醇脱氢酶和辅酶I或辅酶II的反应器中进行反应；c)将反应完毕后的反应液冷冻干燥后与所述滤渣混合，得到人工熊胆粉。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述步骤a)中的缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液或甘氨酸-氢氧化钠缓冲液。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述步骤a)包括如下过程：所述禽畜胆粉用pH＝7～9的缓冲液溶解后，在11000g条件下离心10min后，一次或多次过滤，得到滤渣和滤液，所述滤渣冷冻干燥保存。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述步骤b)包括如下过程：所述滤液加入装有7α-羟基类固醇脱氢酶、7β-羟基类固醇脱氢酶和辅酶I或辅酶II的反应器里室温反应2～8h。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述步骤c)包括如下过程：将反应完毕后的反应液冷冻干燥48h后与所述滤渣混合均匀，得到人工熊胆粉。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述禽畜胆粉为鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉、牛胆粉、兔胆粉、狗胆粉、羊胆粉中的一种或多种混合物。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述禽畜胆粉的主要成分和质量百分比如下：总胆酸：40～65％氨基酸：4～9％微量元素：0.5～1％；其中，所述总胆酸中含有TCDCA，所述TCDCA占禽畜胆粉的质量百分比为40～50％。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述7α-羟基类固醇脱氢酶、7β-羟基类固醇脱氢酶在反应器中以固定化的方式存在。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述步骤b)包括如下酶固定化步骤：在1％的壳聚糖溶液中加入适量醋酸，制得壳聚糖醋酸溶液，将所述壳聚糖醋酸溶液注入到三聚磷酸钠溶液中固化，得到壳聚糖球；将所述壳聚糖球放入盛有0.125％戊二醛水溶液的容器中活化，得到活化壳聚糖微球；称取预定量的所述活化壳聚糖微球，装入层析柱，加入适量的7α-羟基类固醇脱氢酶和7β-羟基类固醇脱氢酶液，采用垂直混合方式使之结合在微球上，得到固定化酶。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，在所述固定化酶反应器中加入所述步骤a)中的滤液作为反应底物溶液，加入预定量辅酶I或辅酶II，使辅酶I或辅酶II:TCDCA＝1:2～1:4(摩尔比)，在20～30℃下，反应2～6h。上述的人工熊胆粉的制备方法，其中，所述的7α-羟基类固醇脱氢酶和7β-羟基类固醇脱氢酶来源于撒丁岛梭菌、脆弱拟杆菌或产气柯林斯菌。本发明为解决上述技术问题而采用的另一技术方案是提供一种人工熊胆粉，由上述制备方法制取。上述的人工熊胆粉，其中，所述人工熊胆粉的主要成分和质量百分含量如下：总胆酸：40～65％氨基酸：4～9％微量元素：0.5～1％；其中，所述总胆酸含有TUDCA和TCDCA，所述TUDCA占人工熊胆粉的质量百分比为23～33％；所述TCDCA占人工熊胆粉的质量百分比为12～30％。上述的人工熊胆粉，其中，所述TUDCA和TCDCA的质量比为1～1.5。本发明对比现有技术有如下的有益效果：本发明提供的人工熊胆粉及其制备方法，是在研究动物胆汁肝肠循环过程的基础上，提出的一种仿生模拟胆汁酸肝肠循环过程，以禽畜胆粉为基质，集成了多次过滤技术，酶固定化技术，酶转化技术来培育人工熊胆粉，本发明方法制取的人工熊胆粉的化学成分的种类和含量都与天然熊胆粉相似，具有化学等值的特点，而且其物理性状、鉴别特征、颜色气味、理化性质、主要成分含量及比例等方面均符合《中国药典》(2015年)中的熊胆粉质量标准。因此，本发明技术具有以下优点：(1)完全使用天然可食用的禽畜胆汁作为人工熊胆制备的原料，不需要再添加其他化学物质如牛磺熊去氧胆酸、胆色素、氨基酸、微量元素等。(2)本发明采用了几种常见动物胆汁，其胆源易采、易得、易加工。(3)本发明采用的多次过滤技术可以将禽畜胆汁中不溶或难溶成分预先分离，降低了对酶的毒害作用，提高了酶的使用寿命。(4)本发明所采用的酶固定化技术和酶转化技术，不但使酶可以重复多次利用，而且与微生物转化技术相比，酶固定转化还便于与反应系统分离，易于控制。(5)通过体外模拟肝肠循环过程，把禽畜胆汁生物转化为与天然熊胆粉化学等值的人工熊胆粉，作为天然熊胆替代品，不仅具有保护濒危动物亚洲黑熊的社会意义，还具有促进熊胆产业健康发展经济价值。具体实施方式下面将结合实施例来详细说明本发明。1、鸡、鸭、鹅胆粉的制备鸡胆、鸭胆、鹅胆从屠宰场购买得到。首先确定胆的数量和重量。用75％酒精分别对鸡胆、鸭胆、鹅胆局部进行消毒，然后分别剖取胆汁。将取出的胆汁冷冻干燥48h，分别得到鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉，放置干燥器中保存备用。2、人工熊胆粉的制备(1)禽畜胆粉的处理使用pH 7.0～9.0的缓冲液溶解禽畜胆粉(鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉)配制1L溶液，超声充分溶解，所述缓冲液优选磷酸盐缓冲液(PBS)、Tris-HCl缓冲液(三羟甲基氨基甲烷)或甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(Gly-NaOH)；将禽畜胆粉溶液在11000g条件下离心10min后，多次过滤，上清液(滤液)作为禽畜胆粉处理液在4℃保存，备用；滤渣冷冻干燥，保存备用。
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