求CZB和KSOM梦幻诛仙培养液液的配置方法！小姑娘是新手！

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2015-04-11 11:46 标签： 完全培养液
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利用四倍体胚胎补偿法制备ES小鼠的技术方法
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&&小鼠胚胎培养液KSOM的问题
小鼠胚胎培养液KSOM的问题
KSOM好像只有Millipore有是吗？不知道Millipore怎么回事，现在订药品总是很不给力的老是订不上。我想自己配KSOM呢，但是照着《小鼠胚胎操作》那本书上的配方配出来的液体效果不理想。不知各位有KSOM的比较成熟的配方吗？谢谢！
我完全按照书上的配过一次，细胞发育停滞且皱缩，皱缩有可能是渗透压的问题，配完液体确实没测渗透压。试剂都是sigma的，水应该也没问题呢。不过，现在已经在millipore订了ksom了，只是还没到货，在等呢，很慢！
如果有阻滞肯定是某个成分有问题。
我们也不测渗透压，没必要。
PH第一次调完后，要放到培养箱2-4h，拿出来再调到7.5。
这样找原因太困难了。其实最好的办法是你找一个实验室，去跟着做一次，养到囊胚。以后就能做好了。
我们实验室的师弟师妹开始也会遇到这种问题，跟着做一两次就好了，也说不上到底错误出在哪里。不过倒是有人配的液体一加酚红就是紫的，那肯定是某个成分加错了，应该是黄色。
要是特别有钱买也无所谓啦:rol:。除了KSOM，G1/G2更好用。有钱就买这个吧，
请问你们体外培养囊赔率达到100%，是从几细胞期开始培养的？培养基是自己配制还是购买？
是从受精卵开始的，也就是1细胞期。
培养液是我们自己配制的KSOM。
现在的小鼠胚胎体外培养体系已经很成熟了，各方面条件控制好的话，达到100%的囊胚率很正常，文献中也有相关的报道。
G1/G2也是培养液吗？请问是哪个公司的？
现在ksom还是不好定，暂时用M16代替着
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标题: 小鼠胚胎培养液KSOM的问题
摘要: [小鼠胚胎培养液KSOM的问题] KSOM好像只有Millipore有是吗？不知道Millipore怎么回事，现在订药品总是很不给力的老是订不上。我想自己配KSOM呢，但是照着《小鼠胚胎操作》那本书上的配方配出来的液体效果不理想。不知各位有KSOM的比较成熟的配方吗？谢谢！ 关键词:[小鼠 胚胎 培养液 胚胎培养液 因子 受精卵 生殖]……
KSOM好像只有Millipore有是吗？不知道Millipore怎么回事，现在订药品总是很不给力的老是订不上。我想自己配KSOM呢，但是照着《小鼠胚胎操作》那本书上的配方配出来的液体效果不理想。不知各位有KSOM的比较成熟的配方吗？谢谢！回复书上的配方没问题，我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化，BSA可以加到6或8，效果非常好。
不知道你用的是什么试剂，必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条件也是必须控制的。
不知道你说的效果不理想是指什么。阻滞、发育不好、胚胎质量差？回复G1/G2也是培养液吗？请问是哪个公司的？回复
是从受精卵开始的，也就是1细胞期。
培养液是我们自己配制的KSOM。
现在的小鼠胚胎体外培养体系已经很成熟了，各方面条件控制好的话，达到100%的囊胚率很正常，文献中也有相关的报道。 现在ksom还是不好定，暂时用M16代替着回复
G1/G2也是培养液吗？请问是哪个公司的？ vitrolife的。做辅助生殖的都用，应该好定到。
M16用于培养效果一般，实在不行可以试试CZB，2cell前用低糖的CZB，过了2cell换成高糖的，这个培养基效果也很好。回复
vitrolife的。做辅助生殖的都用，应该好定到。
M16用于培养效果一般，实在不行可以试试CZB，2cell前用低糖的CZB，过了2cell换成高糖的，这个培养基效果也很好。 我想订millipore的ksom是因为他有种产品不含BSA，不知M16、czb都含BSA呢，现在还是订不到ksom，很着急呢。我准备自己按书上的配方先配了，看看效果。回复
我想订millipore的ksom是因为他有种产品不含BSA，不知M16、czb都含BSA呢，现在还是订不到ksom，很着急呢。我准备自己按书上的配方先配了，看看效果。 BSA不稳定，好像一般都是现加的回复
我想订millipore的ksom是因为他有种产品不含BSA，不知M16、czb都含BSA呢，现在还是订不到ksom，很着急呢。我准备自己按书上的配方先配了，看看效果。 你们的实验要求无蛋白条件吗？那可挺不好弄的。
干脆不加试试，也能养出来，只是发育率低些。
或者试试用PVP什么的替代BSA，不过没这样做过，效果不好说。
另外，弄一小块输卵管共培养也可以。虽然分泌一些因子，不过可以忽略不计，毕竟胚胎本身也分泌蛋白因子。
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