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【求助】细胞因子怎么用ELISA法检测
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这个帖子发布于9年零8天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
菜鸟请教大虾：要检测淋巴细胞分泌的细胞因子，是用什么方法？？一般用TR-PCR检测淋巴细胞中细胞因子的基因表达还是用ELISA法测？本人对ELISA法不了解，如果用ELISA法测的话，是要收集淋巴细胞测，还是收集血液测？？请有经验的朋友赐教，谢谢！急！:(:~)
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野原 edited on
既然你检测的是细胞因子，也就是要检测淋巴细胞分泌的蛋白，当然要用ELISA方法了。RT-PCR是检测基因转录水平上的表达水平，和蛋白的表达没有直接的相关性，因为 有时候可能转录水平很高，但是蛋白表达就很低了。既然要检测血液中的细胞因子，肯定检测的是血清中的蛋白了，所以不用收集淋巴细胞，除非你要检测淋巴细胞表面的蛋白分子时采用收集淋巴细胞。所以你只用收集血液就行了。至于ELISA的方法，我想DXY上有很多的帖子，你随便搜一下就有很多，我就不多说了。
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谢谢楼上的朋友！我的目的就是要看淋巴细胞分泌的细胞因子是增多了，还是减少了，你的意思就是要通过ELISA法检测，只需要收集血液，检测血液中细胞因子，是这样的吗？但是我有一个问题，检测血液中的细胞因子，是不是能保证这些细胞因子肯定来源于淋巴细胞呢，不会有可能是别的细胞分泌的？如果有可能的话，那就不准确了呀？请赐教！
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sguang711 既然你检测的是细胞因子，也就是要检测淋巴细胞分泌的蛋白，当然要用ELISA方法了。RT-PCR是检测基因转录水平上的表达水平，和蛋白的表达没有直接的相关性，因为 有时候可能转录水平很高，但是蛋白表达就很低了。既然要检测血液中的细胞因子，肯定检测的是血清中的蛋白了，所以不用收集淋巴细胞，除非你要检测淋巴细胞表面的蛋白分子时采用收集淋巴细胞。所以你只用收集血液就行了。至于ELISA的方法，我想DXY上有很多的帖子，你随便搜一下就有很多，我就不多说了。sguang711战友你好，我现在做的是小鼠的同样的实验，测血液中淋巴细胞分泌的某种细胞因子。想请教一下，小鼠取血后，需要怎样保存？或者先怎样处理后保存？因为实验室没有液氮罐，但有-80冰箱。直接放冰箱攒够例数一批做ELISA行吗？谢谢了！
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elevenwu 谢谢楼上的朋友！我的目的就是要看淋巴细胞分泌的细胞因子是增多了，还是减少了，你的意思就是要通过ELISA法检测，只需要收集血液，检测血液中细胞因子，是这样的吗？但是我有一个问题，检测血液中的细胞因子，是不是能保证这些细胞因子肯定来源于淋巴细胞呢，不会有可能是别的细胞分泌的？如果有可能的话，那就不准确了呀？请赐教！每一种技术都是油局限性的，elisa是确定不了细胞因子的来源的。如果要定量的测定是那些细胞 分泌了那些因子，BD的CBA可行。同时测定多种因子的量，液相芯片是优势最大的技术。
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crystalzy_2004 sguang711战友你好，我现在做的是小鼠的同样的实验，测血液中淋巴细胞分泌的某种细胞因子。想请教一下，小鼠取血后，需要怎样保存？或者先怎样处理后保存？因为实验室没有液氮罐，但有-80冰箱。直接放冰箱攒够例数一批做ELISA行吗？谢谢了！ 您的问题应该得到解答了吧。我也有同样的疑问，做ELISA时，血样本怎么处理？取多少？谢谢。急用。
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关于丁香园小鼠B-细胞淋巴瘤因子2（Bcl2）elisa分析检测试剂盒实验方法：小鼠ELISA试剂盒、人ELISA试剂盒、马ELISA检测试剂盒、病原ELISA检测试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、猪ELISA试剂盒、牛ELISA试剂盒等ELISA试剂盒。公司elisa试剂盒说明书等更多产品详细信息，请与我们销售人员联系。
公司主要经营进口原装Elisa试剂盒，种类齐全，小鼠B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)elisa分析检测试剂盒实验方法价格实惠，凡购买我公司产品的新老客户，即可享免费代测实验服务，可检测人源，小鼠，大鼠，猪，狗，猴，兔，羊，鸡，牛，鸭子，鱼，植物，昆虫等各种种属样本。全程提供技术支持。如需其他Elisa试剂盒说明书及报价，!&产品名称:小鼠B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)elisa分析检测试剂盒实验方法英文名称:Bcl2 ELISA Kit规格：96T/48T包装：盒检测原理：采用双抗夹心法保质期：六个月产品保存条件：2-8&C应用范围：仅供科研研究实验使用小鼠B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)elisa分析检测试剂盒实验方法样本处理及要求1. &血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2. &血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8&C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3. &组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000&g离心5~10分钟，取上清检测。4. &细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1. &本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。2. &实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3. &若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。4. &使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5. &若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。6. &某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。7. &建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水操作步骤1.&&从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.&&设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50&L；3.&&样本孔中加入待测样本50&L；空白孔不加。4.&&除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100&L，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.&&弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350&L），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.&&每孔加入底物A、B各50&L，37℃避光孵育15min。7.&&每孔加入终止液50&L，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。人缺血修饰白蛋白 && & IMA && &规格：&& &48T/96T人醛缩酶 && & ALD && &规格：&& &48T/96T人醛固酮 && & ALD && &规格：&& &48T/96T人全段甲状旁腺素 && & i-PTH && &规格：&& &48T/96T人去唾液酸糖蛋白受体 && & ASGPR && &规格：&& &48T/96T人去甲肾上腺素 && & NA && &规格：&& &48T/96T人趋化因子 && & FK && &规格：&& &48T/96T人清道夫受体B && & SRB/CD36 && &规格：&& &48T/96T人鞘磷脂 && & SM && &规格：&& &48T/96T人桥粒芯糖蛋白-1 && & Dsg-1 && &规格：&& &48T/96T人羟赖氨酸 && & Hyl && &规格：&& &48T/96T人羟基胶原吡啶交联 && & OH-PYD && &规格：&& &48T/96T人羟脯氨酸糖蛋白 && & HRGP && &规格：&& &48T/96T人羟脯氨酸 && & Hyp && &规格：&& &48T/96T人强啡肽 && & Dyn && &规格：&& &48T/96T人潜伏膜蛋白1 && & LMP-1 && &规格：&& &48T/96T人前心钠肽 && & Pro-ANP && &规格：&& &48T/96T人前心钠肽 && & Pro-ANP && &规格：&& &48T/96T人前列腺特异性抗原 && & PSA && &规格：&& &48T/96T人前列腺酸性磷酸酶 && & PAP && &规格：&& &48T/96T人前列腺素F && & PGF && &规格：&& &48T/96T人前列腺素E2 && & PGE2 && &规格：&& &48T/96T人前列腺素E1 && & PGE1 && &规格：&& &48T/96T人前列腺素D合成酶 && & PTGDS && &规格：&& &48T/96T人前列腺素D合成酶 && & PGDS && &规格：&& &48T/96T人前列环素 && & PGI && &规格：&& &48T/96T人前胶原C端肽酶 && & PCP && &规格：&& &48T/96T人前白蛋白 && & PA && &规格：&& &48T/96T人普通急性淋巴细胞白血病抗原 && & CALLA && &规格：&& &48T/96T人葡萄糖转运蛋白3 && & GLUT3 && &规格：&& &48T/96T人葡萄糖转运蛋白1 && & GLUT1 && &规格：&& &48T/96T人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽 && & GIP && &规格：&& &48T/96T人葡萄糖氧化酶 && & GOD && &规格：&& &48T/96T人葡萄糖激酶调节蛋白 && & GKRP && &规格：&& &48T/96T人葡萄糖激酶 && & GCK && &规格：&& &48T/96T人葡萄糖6磷酸异构酶 && & GPI && &规格：&& &48T/96T人葡萄球菌蛋白A && & SPA && &规格：&& &48T/96T小鼠B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)elisa分析检测试剂盒实验方法人破伤风抗体 && & Tetanus Ab && &规格：&& &48T/96T人破骨细胞分化因子 && & ODF && &规格：&& &48T/96T人泼尼松龙 && & Prednisolone && &规格：&& &48T/96T人平滑肌肌球蛋白 && & SMM && &规格：&& &48T/96T&
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人凝血因子Ⅱ（FⅡ）ELISa免疫检测试剂盒价格全国包邮、发货及时、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、实验效果好，凡购买公司ELISA试剂盒提供免费代测服务，提供一系列实验技术指导及全方位的售前售中售后服务。
人凝血因子Ⅱ（FⅡ）ELISa免疫检 详细信息
人凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISa免疫检测试剂盒价格检测范围：人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。产品名称：人凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISa免疫检测试剂盒价格英文名称：HumancoagulationfactorⅡ,FⅡELISA Kit产品性状：盒装液体。运输条件：2-8℃低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。原理：ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。ELISA试剂盒检测类型：双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。人白介素2受体(IL-2R)elisa免疫检测试剂盒售后服务类型和操作步骤ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。（一）双抗体夹心法、（二）一步法、（三）间接法测抗体、（四）竞争法。优点：&1、原装进口抗体&&高效、灵敏、特异&2、规范包被操作&&吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高&3、先进的优化方案&&重复性高，可靠性强&4、技术服务要求：专业，规范，高效&5、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床 &技术原理：(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。小鼠整合素&-IIb(Itga2b/CD41)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Itga2b/CD41 ELISA Kit小鼠整合素&5(Itgax/CD11c)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Itgax/CD11c ELISA Kit小鼠长停滞特异性基因产物6(gas-6)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&gas-6 ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&MUC7 ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&MUC5B ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&MUC5AC ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&MUC2 ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&MUC1 ELISA Kit小鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&REG-1a ELISA Kit小鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Apo-H ELISA Kit小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Apo-E ELISA Kit小鼠载脂蛋白B48(apo-B48)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&apo-B48 ELISA Kit小鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&apo-B100 ELISA Kit小鼠载脂蛋白B100(Apo B100)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Apo B100 ELISA Kit小鼠载脂蛋白B(ApoB)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&ApoB ELISA Kit小鼠载脂蛋白A5(apo-A5)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&apo-A5 ELISA Kit小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&apo-A1 ELISA Kit小鼠载脂蛋白A1(Apo A1)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Apo A1 ELISA Kit人凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISa免疫检测试剂盒价格小鼠孕酮受体(PROGR)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&PROGR ELISA Kit小鼠孕酮(PROG)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&PROG ELISA Kit小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&PROG ELISA Kit小鼠诱导型一氧化合成酶(iNOS)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&iNOS ELISA Kit小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&iNOS ELISA Kit小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&FFA ELISA Kit小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Free-T3 ELISA Kit小鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&FT4 ELISA Kit小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&F-TESTO ELISA Kit小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Hp-IgG ELISA Kit小鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&IHH ELISA Kit小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&IDO1 ELISA Kit小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Shh-N ELISA Kit小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&INH-B ELISA Kit小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&INH-A ELISA Kit小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&OSM ELISA Kit小鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&HBcAb ELISA Kit小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&HBsAg ELISA Kit小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&HBsAb ELISA Kit小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&HBeAg ELISA Kit小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&HBeAb ELISA Kit小鼠乙酰辅酶A(acetyl-CoA)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&acetyl-CoA ELISA Kit小鼠乙酰胆碱转移酶(CHAT)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&CHAT ELISA Kit小鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&AchE ELISA Kit小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&AChRab ELISA Kit小鼠乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&ACH ELISA Kit小鼠胰脂肪酶(PL)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&PL ELISA Kit小鼠胰激肽原酶(PK)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&PK ELISA Kit小鼠胰高血糖素样肽2(GLP-2)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&GLP-2 ELISA Kit小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&GLP-1 ELISA Kit小鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&GC ELISA Kit小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&Amylin ELISA Kit小鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&ICA ELISA Kit小鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&IAA ELISA Kit小鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&PI ELISA Kit小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒&进口分装&，英文名：&IGFBP-6 ELISA Kit&
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