青链双抗和低分子肝素钠钠能一起用吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2015-01-01 10:57 标签： 一起同过窗百度云链接
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【求助】关于双抗的配制
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各位大虾，本人是第一次做细胞的菜鸟，有个关于双抗问题请教各位：分子克隆上说青霉素终浓度100单位/毫升，链霉素100微克/毫升；这样算下来100倍的储液是一只链霉素（100万单位）和两只青霉素（80万单位）160毫升。但科里的老师说100倍的储液是一只链霉素（100万单位）和两只青霉素（80万单位）80毫升，链霉素不好称量。我知道抗生素的作用浓度是一个范围，但这样链霉素的浓度是不是太高了，会不会影响细胞的生长？谢谢各位！！！
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市面上买的小瓶子装的，不就是链霉素加5ML缓冲液，青霉素加四毫升。分装-20度保存，用时在一升培养液中各加0.5ML。
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楼主，我将我配制双抗的方法告诉你看看有没有用
从医院买到人用，青霉素(160万单位/瓶，1g),链霉素(100万单位/瓶，忘了几克了），贮液标准(100倍）。我称取青霉素0.625g(100万单位)和链霉素(整瓶)用100ml生理盐水溶解，这样就配制成了1万/ml的贮液，添加标准按100IU/ml来算，用时就按10ul/ml，就是这样了，希望对你有用。
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最简单的方法如下：用20mL空针抽16毫升三蒸水(或PBS)，溶160万单位/瓶的青霉素G钠一支，过滤除菌；用10mL空针抽10毫升三蒸水(或PBS)，溶一支100万单位/瓶的硫酸链霉素一支，过滤除菌。分装至EP管中，-20度保存。使用前每100ml培养液加双抗各100ul-150ul即可。细胞培养液双抗浓度：青霉素G钠，100-1000U/ml；硫酸链霉素，100-1000μg/ml(100万单位=1g)。
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十分感谢各位大虾，小弟受益非浅(y)！！！！！！！
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我们也是用的市面上的小瓶装的，青霉素80万单位的，链霉素100万单位的，我们配制的方法是：将4ml的生理盐水注入小瓶中溶解青链的粉剂，然后抽0.125ml青霉素和0.1ml链霉素注入50ml培基中，配成500U/ml青链霉素双抗液。我养的是滋养细胞，我师妹们养子宫平滑肌，血管平滑肌双抗液用的浓度是我的一半，供你参考！但青链霉素我们是现配现用，24h后会降解！
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飘泊 市面上买的小瓶子装的，不就是链霉素加5ML缓冲液，青霉素加四毫升。分装-20度保存，用时在一升培养液中各加0.5ML。恩，简单明了，中间要不要过滤除菌呢？谢谢！
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ABR 功能缺陷加重急性缺血性脑损伤的胆碱能机制 ABR 功能缺陷加重急性缺血性脑损伤 的胆碱能机制 （中文摘要） 脑卒中（Stoke），又称中风或脑血管意外（Cerebrovascular accident ），有发病突
然，致残、致死率高的特点，是心血管系统的常见病、多发疾病，已经成为严重影响
公众健康安全的世界性问题；脑卒中在我国的发生率更高，随着我国人口的老年化进
程，其发病率有越来越高的趋势。目前，我国每年新发脑卒中患者200万，现有幸存
者700万，其中75%丧失劳动力，40%重度致残，每年直接或间接经济损失高达数百
亿元。因此，脑卒中的防治已成为卫生工作中的一项重要课题，越来越引起国内外医
学界的重视，深入探讨脑卒中的发生机制，在此基础上找出防治的新策略也变得非常
必要。 动脉压力感受性反射 arterial baroreceptor reflex，ABR 功能，是心血管系统活动
最重要的自身调节机制。通过最近二十多年的研究发现，多种心血管系统疾病的发生
发展过程与ABR功能异常有关，因此，对ABR功能的研究越来越得到人们的重视。
1988年到1998年10年间，意大利学者La Rovere等用大量的临床数据证实，BRS高低可
以预测急性心肌梗死 acute myocardial infarction，AMI 病人的预后。他的研究发现，
死亡患者的ABR功能明显低于幸存者。同时发现，在脑卒中动物模型以及慢性脑血管
疾病的病人身上，也出现了BRS受损情况。Robinson及同事也发现，
BRS功能低下
的脑卒中病人，其预后明显要差于BRS正常者。我们教研室的研究发现，BRS决定卒
中易发型高血压大鼠 SHP-SP
的寿命，BRS高的动物，脑卒中发生延后，寿命延长。
因此，ABR功能与脑卒中之间有密切的联系，是影响脑卒中预后的一个非常重要的因
素。本课题主要对ABR功能损伤加重急性脑缺血损伤的的机制进行探讨，以找到新的
脑卒中防治的药物靶点。 第一个实验在SD大鼠SAD模型上检测“ABR功能低下加重急性缺血性脑损伤” 。
SAD-MCAO模型中，MCAO术后24小时神经行为学评分SAD+MCAO组明显高于
MCAO组（3.3 vs 2.7 ）；半脑梗死区比例SAD+MCAO组明显高于MCAO组（19.1% vs
15.4%）。 第二个实验在SD大鼠SAD模型上检测“ABR功能低下对大脑皮层炎性因子及细 - 3 -
第二军医大学博士学位论文
胞凋亡的影响” 。SAD一个月后，ELISA法检测大脑皮层中IL-1β和IL-6，
TNF-α含量，
结果发现：SAD组IL-1β和IL-6 明显高于sham组（128.3μg/g vs 80.2μg/g，1.624μg/g vs
0.763μg/g ），TNF-α含量差异不显著。TUNEL染色的脑片上SAD组可见凋亡细胞，sham
组未发现。在原代培养的小胶质细胞培养体系中，ACh可以剂量依赖性的减少LPS诱
导的小神经胶质细胞释放TNF-α （223.15±9.74 、204.89±11.6 、 122.08±4.41 vs
338.14±34.53pg/ml ），且这种作用可以被α7nAChR 阻断剂MLA逆转。另外，ACh和
α7nAChR 特异性激动剂PNU-282987 都可以减少LPS 诱导的小神经胶质细胞释放
TNF-α、IL-1β、IL-6 。 第三个实验在SD 大鼠SAD模型上检测“ABR 功能低下对大脑皮层VAChT 、
α7nAChR 、SIRT1 的表达的影响” 。SAD一个月后，WB法检测大脑皮层中VAChT 、
α7nAChR、SIRT1的表达，结果发现SAD组均低于sham组。 第四个实验利用α7基因敲除小鼠，检测“α7nAChR对H O 诱导的原代培养神经元 2 2
凋亡的保护作用” 。体外培养7天的原代神经元，经H O 诱导凋亡，用流式细胞技术检 2 2
测凋亡率。ACh能显著降低H O 诱导的神经元凋亡（16.6% vs 32.4% ），这种保护作用 2 2
可以被α7nAChR阻断剂MLA逆转。用TUNEL法检测得到相似的结果。 第五个实验利用SIRT1基因敲除小鼠，检测“SIRT1对急性缺血性脑损伤的影响” 。
SIRT1基因敲除小鼠在MCAO24小时后神经行为学评分明显高于野生型小鼠（3.6 vs
2 ），半脑梗死率也明显高于野生型小鼠（24.8% vs 13.3% ）。体外培养7天的SIRT1基
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miRNA221在精氨酸影响大鼠动脉粥样硬化中作用.pdf52页
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复旦大学硕士学位论文 miRNA一221在精氨酸影响大鼠动脉粥样硬化中的作用 中文摘要 第一部分精氨酸对动脉粥样硬化大鼠主动脉miRNA-221、eNOS的表达影响 [目的]： 1 研究精氨酸在SD大鼠动脉粥样硬化形成中的预防及治疗作用； 2 miRNA一221、一氧化氮合酶在精氨酸干预sD大鼠动脉粥样硬化形成中的作用。 组lO只、精氨酸治疗组10只、辛伐他汀组10只、联合治疗组10只，除普通组 外其余5组给予高脂饮食 精氨酸预防组加用精氨酸 12周。12周后，普通组 和高脂组给予生理盐水、精氨酸预防组和精氨酸治疗组给予精氨酸注射液、辛伐 他汀组给予辛伐他汀片、联合治疗组给予精氨酸注射液和辛伐他汀片灌胃l2周， 处死大鼠。 2 检测6组大鼠血清hs-CRP，取各组大鼠主动脉制作常规HE染色病 理切片。 3 采用real-timePCR方法检测各组大鼠主动脉miRNA一221表达量， western blot检测大鼠主动脉eNOS的表达量。 [结果]： 1 主动脉常规病理提示除普通组外，其余5组主动脉内膜厚度均增加， 精氨酸治疗组、精氨酸预防组、辛伐他汀组、联合治疗组内膜厚度增加程度均较 均增加，较普通饮食组差异有统计学意义 p O．05 。其中，精氨酸治疗组、精氨 酸预防组、辛伐他汀组、联合治疗组hs―CRP水平较高脂组降低，有统计学意义 酸预防组、辛伐他汀组、联合治疗组miRNA-221表达较高脂组降低，差异有统计 学意义 p O．05 ：eNOS水平在高脂饮食的5组较普通组明显降低，其中，精氨 酸预防组、辛伐他汀组、联合治疗组miRNA-221表达较高脂组升高，差异有统计 学意义 p O．05 。 [结论]： 1 大鼠可以通过高脂饮食成功建立动脉粥样硬化模型，口服精氨酸可以 减轻高脂饮食大鼠血管内皮炎症反应、减轻内膜增厚，延缓动脉粥样硬化的发生、 发展。 2 精氨
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