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野水鸭等携带鸭乙型肝炎病毒的研究体会
更新时间: 05:56:46
  鸭乙型肝炎病毒(DHBV)与^乙型肝炎1.4方法DotBIot:DHBVDNA斑点杂病毒(HBV)同属嗜肝DNA病毒科。DHBV交试验见文献“.DHBsAgDotEIA试验见感染的鸭可作为研究HBV致病机理和抗肝文献。  嵌药物的动物模型,自Mason0和周翊钟1.5 DHBV感染雏鸭试验发现DHBV以来.国内外学者相继对一些地1.51将收集的野水鸭血清做DHB一区家鸭鸭种感染DHBV作了报导。.至今尚VDNA杂交.选阳性血清经腹腔和腿静脉接无对野水鸭的调查,我们在广东、海南两省种1日龄广州麻鸭(DHBVDNA阴性)共8调查首次发现鸭群中亦有感染DHBV,特别只.其中4只每只接种0.2ml,4只每只接种是一种野水鸭有较高的感染率,为此对该鸭0.02ml(用无菌Hanks液稀释至0.2ml后接种的生态环境及感染情况作了一些调查,报种),不同时间采血,分离血清后做DotBlot告如下检测  1.材料和方法1.5.2将阳性DHBVDNA的上海麻  1.1鸭种。广州麻鸭(早年由福建龙岩鸭血清经腿静脉感染广州1日龄麻鸭共34f进,购自广州江村养鸭场).野水鸭(由美只.每只0.2m1.不同时间采血,分离血清后国引进广州已数年).海南三亚麻鸭.各鸭种做DotBlot检测。  均为分棚单独饲养l6野水鸭DHBV电镜观察:10ml阳1.2鸭血清标本采集.经腿静脉采血或性DHBVDNA野水鸭血清.6000r/min离心杀鸭放血.分离血清后置一40℃保存。6O分钟.取上清,经35000r/min超速离心1.3试剂:DHBV质粒及上海麻鸭阳4h,将沉淀物悬浮于Hank’s溶液中.制铜性DHBV血清系医科院医药生物技术研究网,3磷钨酸负染、电镜观察。  所赠送,缺口翻译药盒嗡自Promcgc公司.2结果dCTP购自北京亚辉公司.NC膜购自  2.1三个鸭种血清DHBVDNA斑点Amersham公司,DHBsAgDotE1A检查药杂交及DotEIA检测结果.从表l、表2可盒购自上海医科大学微生物学教研室。看出.广扑I麻鸭、海南麻鸭及野水鸭的自然感染率分别为24.2、38.1、63.2.DHBsAg的阳性率分别为52.2、30、7O%由于用DotBlot和DotElA两种方法检测的鸭数量不同,我们对用此二种方法都检测了的鸭进行了比较,发现这二种方澎的符合率为野水鸭100(7/7),海南麻鸭75(6/8),广州麻鸭58.3(7/12),与文献报道的94不太,致,这可能与麻鸭血中有携带DHBsAg状态而无病毒DNA复制有关。此外我们发现野水鸭的DHBsAgDotE1A结果均为强阳性,而DHBV DNA DotBlot结果均为弱阳性.这可能与该野水鸭DHBV的基周序列与家鸭DHBV不全一致有关。该野水鸭一日龄雏鸭DHBV阳性率为80(8/10),说明此鸭种有着很高的垂直传播水平衰1鸭:D―HB―V D―N―A~DotBlo―t丛堕坐阳性数阳性卑()阳性数阳性率(1广州麻鸭8/33 84 2 12/28 92.2海南麻鸭 6,20 s(】野水鸭2/38船2 7/10 7(】魏譬8/1U 80.o一。一  2.2 DHBV感染雏鸭试验结果从表2可以看出,用上海麻鸭DHBV感染广州麻鸭,可以获得88.2的感染率,血中病毒持续时间达到16天时就有DHBVD―NA阴转,用野水鸭DHBV感染广州麻鸭0.02ml/只组均获得100感染率,且血中病毒持续时间至少可达6O天从DotBlot胶片结果来看,0.2ml/只组鸭体内的血中病毒量较大。中国论文服务网是为广大评职称客户提供全文方位的药学论文下载、临床医学论文快速发表服务的首选网站。  衰8t:。2ml/R野水鸭1日0.02ml/只DHBV广州麻鸭2ml,只≥L6~21天&6{)天&天  2.3野水鸭品种鉴定及生态环境  初生雏鸭重约4O克,头顶上部、背、尾喙、蹼、爪均为黑色,余为黄色绒毛,黑色眉纹明显.成年雄鸭头颈和颈上部羽色墨绿,有光泽,前胸和背部羽毛褐色,缀有深褐色条斑,喙、脚、蹼为黄绿色.爪黑色.翼镜呈金属紫兰色,雌鸭塞身羽毛我褐色,缀黑色细花纹,翼镜蓝绿色,经鉴定属绿头鸭,学名AnasPlatyrhynchost一般在池边结栅张网饲养,困该鸭种2~3个月即可飞翔,棚户为保持野鸭品种纯化,不与其他家鸭混养  2.4电镜结果:该野水鸭DHBV形态  学研究见电镜照片,DHBV完整颗粒呈圆形+大小不一,直径36~57irm.可见双层外膜及内核结构,为DKBV病毒体。另有一类球形空心颗粒,直径36-64nm,为DHBV的表面扰原艇粒。还有一种21~39nm的小球形颗粒,数量不多,可能是表面抗原颗粒的裂解产物,电镜照片中券可见其解离状态,未见丝状和管状体,与文献;比较,该种DHB'V与家鸭DHBV的形态基本相似。  3.讨论  据文献介绍.我国家鸭祖先系由绿头鸭和斑头鸭驯化而来,但因各地饲养情况和品种混杂交配不问,出现许多新品种,在湖泊地区目前还能见一些与野鸭交配过渡型的家养鸭群。因此对该野鸭DHBV的追踪调查及基因克隆分析可能有助于家鸭DHBV基因编码与同源性比较本研究显示.该野水鸭有着较高的自然感染率63.2,其O.02ml血清即可使家鸭雏鸭10b感染,可见毒l办较强,并且感染后鸭血中DHBV至少持续6O天,有可能建立一种鸭乙肝慢性感染或长期携带  DHBV的乙肝实验模型  本研究得到香港郑孙文淑基金会的资助及本室陈征途、董伯振等同志的协助,特此致谢谢。  参考文献  1 M 0nWS e-tal_JViroll98 36.a29  2.厨翊钟上海医学,):1.?  摹碍,苷?中华传枣病杂志,l蝴6F“3):133“陈盖I『卿,苷中华传染病杂志.1983ll(2):68  5.蔓维,等上梅医学学报.):413  6童善庄,等上褥第二医科大学学报,1990;i0(3)
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8个鸭品种生长素基因遗传多样性研究
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8个鸭品种生长激素基因遗传多样性研究
专业:动物遗传育种与繁殖
研究生:许盛海
导师:陈国宏教授
(扬州大学动物科学与技术学院)
生长激素(Growth
素,对动物有显著加快肌肉、骨骼生长,降低脂肪含量,促进生长发育等
作用。本研究以鸭生长激素基因为研究对象,根据其序列(GenBank登录
绍兴鸭、山麻鸭、荆江鸭、金定鸭、缙云麻鸭等8个鸭品种生长激素基因
整个编码区、调控区及内含子2、3区段进行单核苷酸多态性(SNP)扫描,
分析是否存在多态性,比较不同品种的基因型频率,并探讨不同基因型与
鸭种质特性之间的关系,为今后育种过程中的标记辅助选择(MAS)提供理
论依据。结果如下:
1.鸭生长激素基因5’调控区和3’调控区共检测出多态位点2个:5’调
态性,说明3’调控区是高度保守的区域。统计结果发现:5’调控区在北京
鸭、西湖野鸭、樱桃谷鸭、山麻鸭,缙云麻鸭中趋于纯合保守,在绍兴鸭、
荆江鸭中变异也相对较小,而在金定鸭中表现出较大的变异性,这反映出
了金定鸭较为独特的种质特征。
2.鸭生长激素基因编码区共检测出多态位点1个,即第4外显子3701
处发现C—T,但表现为沉默突变。该基因座的基因型频率和基因频率分
布与品种有关,肉用型鸭CC基因型频率显著高于蛋用型,即等位基因C
和D分别是肉用型和蛋用型的优势基因。另外,等位基因c频率最高的北
京鸭和樱桃谷鸭属于高产肉用型,而等位基因D频率最高的金定鸭和绍兴
鸭属于高产蛋用型鸭种。
3.鸭生长激素基因内含子2、3的共检测出多态位点8个:在2593,
鸭除在内含子2的2593处表现出变异性,在其他位点都趋向于纯合保守,
表现了一定程度的品种保守性;绍兴鸭几乎在所有位点都相对趋向于纯合
保守,也表现了较强的品种保守性;而其他品种各个位点总体上具有丰富
的多态性,表现了品种的变异性。可见,在生长激素基因内含子2、3的
变异水平上,北京鸭、樱桃谷鸭、绍兴鸭表现出了独特的种质特征。
关键词:鸭;生长激素基因;单核苷酸多态性
StudiesonGenetic
ofGrowthHormone
breedsofDuck
M.S.Candidate:Xu
Sheng·hal
Advisor:Prof.Chen
ofAnimalScience
Technology,Yangzhou
Growthhormoneone
regulating
afteranimalsare
couldremarkablethe
ofmusclesand
expeditegrowth
accelerate
thecontentof
bones,reduce
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野鸭湖畔互祝愿
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薛连通中国青年旅行社的两辆大巴载着出版社近六十名离退休干部,前往延庆县野鸭湖国家湿地公园游览。自去年出版社实行医疗制度改革后,退休职工凭北京市统一颁发的“社会保障卡”就诊取药,不必每月到社里去报销医药费,因此,平时大家见面的机会不多。春游是一次离退休老干部相互见面、问候的好机会,所以老同志一见面显得格外亲切,相互热情问候,畅谈离退休生活之情趣。整个车厢充满了亲切的欢声笑语。开车以后,出版社服务中心龚国琴副主任转达了社领导对老同志的问候,说明了这次活动的安排,中青旅导游向大家介绍我们去的景点及旅游注意事项等。旅游大巴行驶在北京至八达岭的高速公路上,一片片“新城”展现在我们眼前。北京的城市建筑可谓月新年异,几年不来,许多几十层的高楼就在公路边拔地而起。车过居庸关进入八达岭景区,长城逶迤随山峦起伏,好一派北国风光。长城作为防御工事而修建已有几千年了,而今长城已经成为我国最壮观的人文古迹。翻过八达岭,绵延的长城已被“甩”在身后,很快就到了延庆康庄西北的野鸭湖湿地公园。大家下车后看到一片湖区和公园建筑,导游带领大家进入景区。他介绍说:野鸭湖湿地公园总面积达6813公顷,与河北省的官厅水库水系相通,是北京地区最大的湿地公园。这里山清水秀、湖光潋滟,是冬春南北候鸟的中转栖息地。这里有各种鸟类247种:其中有国家一级保护的黑鹳、白鹤、金雕等6种;二级保护的天鹅、灰鹤、鸳鸯等30余种。导游说到了夏季茂密的水草和植被是鸟儿生儿育女的理想家园,成群的鹤鸟在这里栖息、繁殖。大家沿着湖滨漫步,这里绿地、花坛、山石错落其间,营造了一个优雅的氛围。一群野鸭在这里栖息戏水,这是在城内少见的优美景色,老同志纷纷举起相机拍照。在这之前大家参观了湿地博物馆,通过图文介绍,观看鸟类标本,使大家对什么是湿地,湿地对调节生态、繁衍物种、保护环境、科学研究等方面的重要意义和作用,了解了我国在湿地开发建设方面所取得的成果,相当于对我们进行了一次保护生态与科普知识教育。中午,龚主任和导游一起带领大家驱车前往距野鸭湖不远的延庆柳沟凤凰城农家院,被称为京郊十大金牌农家菜,柳沟农家五号院。柳沟这个地方的农民善于做豆腐及豆腐制品,风味独特,与城里的豆腐不同。老同志进入农家院以后,八人一桌,自由组合,各种菜肴已经摆满餐桌,接待人员热情招呼大家就餐。每个餐桌中间摆着一个大火锅盆,热气腾腾,里面有豆腐、肉片、白菜、粉条,四周有鸡、鸭、鱼肉,多种豆制品、蔬菜等,十分丰富,具有醇香、味浓、实惠的特色风味,配以贴饼子、玉米段可谓真正的农家盛宴。吃惯城里自家饭菜的老同志,品尝一下农家饭都觉得香甜可口,这也是享受一种“口福”。老同志围在一起同饮共餐、边说边吃也是一种乐趣。饭后大家逛了农村小农贸市场,选购了一些土特产。下午三时,每位老同志都带着社里送的柴鸡蛋和农家自制的风味豆腐,愉快的上车返回出版社。一路上大家兴致不减,回味野鸭湖的风光和农家豆腐宴的风味,下车后相约秋游再相会。
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