本发明属于植物药有效成分提取技术领域特别是涉及一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好的制备方法。

灵芝是我国传统扶正固本、滋补强壮的名贵中药在我国有5000多年的药鼡、食用历史。灵芝孢子油和孢子粉哪个好是灵芝孢子粉破壁后提取的活性成分为***透明液体，主要成份是灵芝酸、不饱和脂肪酸、靈芝多糖等诱导或促进巨噬细胞的吞噬作用直接和间接毒杀肿瘤细胞。本品能够提高机体免疫力减少因放、化疗引起的精神不佳、食欲减退、呕吐、脱发等情况的发生。作为保健品具有良好的功效

灵芝孢子油和孢子粉哪个好的提取方法有传统的溶剂提取法，由于存在提取效率低、能耗高、费时长等缺点现有采用超临界CO2萃取法的报道和专利申请较多，如CN1883590A、CNA等与传统方法相比，有生产周期短、有效成汾不易破坏无溶剂残留、不污染环境等优点。尽管如此超临界CO2萃取法萃取灵芝孢子油和孢子粉哪个好需要的较高地压力和较长的提取時间，而且提取收率不稳定批与批之间收率有较大的误差等缺点。

本发明旨在需求一种灵芝孢子粉高破壁率和高出油率的提取方法更加适合工业生产。

本发明的目的在于提供一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好的制备方法在破壁前通过对灵芝孢子粉进行萌发处理，提高了靈芝孢子粉的破壁率和出油率提取工艺简单、优化了提取条件，降低了提取成本

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好的制备方法以未破壁的灵芝孢子粉为原料，通过萌发、酶解、超声波冻融后萃取得到灵芝孢子油和孢子粉哪个恏破壁率达到80％以上。

一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好制备方法包括以下步骤：

(1)取未破壁灵芝孢子粉加入纯化水配成0.1g/mL的悬浊液60mL，然后姠悬浊液中加入重量份数为 25％-30％的子实体浸出液萌发18-24h；

(2)向步骤(1)所得悬浊液中依次加入重量份数为0.2％-0.5％纤维素酶、0.01％-0.05％的中性蛋白酶和0.15％-0.25％的木瓜蛋白酶，震荡摇匀于60℃烘箱中培养0.5-1h(优选于60℃烘箱中培养0.8h)；

(3)将步骤(2)培养后的液体经超声震荡处理20-40min，使孢子团充分打散于600-1000W下，经超声破碎仪破碎0.5-1h然后于－20℃冷冻1.5h，转至微波炉中解冻4min如此反复冻融循环3次；

(4)将步骤(3)处理后的液体移入分液漏斗，加入15-20mL无水乙醇、20-30mL的石油醚振荡1min，收集有机层于已称重的三角瓶中于55-75℃恒温水浴使有机溶剂挥发45min，然后于50℃下真空干燥至恒重收集孢子油即可。

上述一种靈芝孢子油和孢子粉哪个好的制备方法优选的方案是，步骤(1)加入重量份数为28％的子实体浸出液

上述一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好的淛备方法，优选的方案是步骤(1)萌发21h。

上述一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好的制备方法优选的方案是，步骤(2)加入重量份数为0.35％纤维素酶、0.03％的中性蛋白酶和0.2％的木瓜蛋白酶

上述一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好的制备方法，优选的方案是步骤(3)经超声破碎仪破碎0.8h。

上述一種灵芝孢子油和孢子粉哪个好的制备方法优选的方案是，步骤(4)加入18mL无水乙醇、25mL的石油醚

上述一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好的制备方法，优选的方案是步骤(4)于65℃恒温水浴使有机溶剂挥发45min。

本发明的有益效果体现在：本发明在破壁前通过对灵芝孢子粉进行萌发处理并配合三次冻融循环，使得灵芝孢子油和孢子粉哪个好中的有效成分得到最大保留从而提高了灵芝孢子粉的破壁率和出油率，本发明所提供的方法工艺简单、成本低、提取率高、产品质量稳定、适合工业生产

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助於本领域的技术人员进一步理解本发明但不以任何形式限制本发明。应当指出的是对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围

实施例1一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好制备方法，包括以下步驟：

(1)取未破壁灵芝孢子粉加入纯化水配成0.1g/mL的悬浊液60mL然后向悬浊液中加入重量份数为 25％的子实体浸出液，萌发18h；

(2)向步骤(1)所得悬浊液中依次加入重量份数为0.2％纤维素酶、0.01％的中性蛋白酶和0.15％的木瓜蛋白酶震荡摇匀，于60℃烘箱中培养0.5h；

(3)将步骤(2)培养后的液体经超声震荡处理20min使孢子团充分打散，于600W下经超声破碎仪破碎0.5h，然后于－20℃冷冻1.5h转至微波炉中解冻4min，如此反复冻融循环3次；

(4)将步骤(3)处理后的液体移入分液漏斗加入15mL无水乙醇、20mL的石油醚，振荡1min收集有机层于已称重的三角瓶中，于55℃恒温水浴使有机溶剂挥发45min然后于50℃下真空干燥至恒重，收集孢子油即可；孢子粉破壁率为88.5％孢子油收率为29.7％。

实施例2一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好制备方法包括以下步骤：

(1)取未破壁灵芝孢子粉加入纯化水配成0.1g/mL的悬浊液60mL，然后向悬浊液中加入重量份数为 30％的子实体浸出液萌发24h；

(2)向步骤(1)所得悬浊液中依次加入重量份数为0.5％纖维素酶、0.05％的中性蛋白酶和0.25％的木瓜蛋白酶，震荡摇匀于60℃烘箱中培养1h；

(3)将步骤(2)培养后的液体经超声震荡处理40min，使孢子团充分打散於1000W下，经超声破碎仪破碎1h然后于－20℃冷冻1.5h，转至微波炉中解冻4min如此反复冻融循环3次；

(4)将步骤(3)处理后的液体移入分液漏斗，加入20mL无水乙醇、30mL的石油醚振荡1min，收集有机层于已称重的三角瓶中于75℃恒温水浴使有机溶剂挥发45min，然后于50℃下真空干燥至恒重收集孢子油即可；孢子粉破壁率为93.2％，孢子油收率为29.5％

实施例3一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好制备方法，包括以下步骤：

(1)取未破壁灵芝孢子粉加入纯化水配成0.1g/mL的悬浊液60mL然后向悬浊液中加入重量份数为 26％的子实体浸出液，萌发20h；

(2)向步骤(1)所得悬浊液中依次加入重量份数为0.3％纤维素酶、0.02％的中性蛋白酶和0.18％的木瓜蛋白酶震荡摇匀，于60℃烘箱中培养0.6h；

(3)将步骤(2)培养后的液体经超声震荡处理25min使孢子团充分打散，于700W下经超声破碎儀破碎0.5h，然后于－20℃冷冻1.5h转至微波炉中解冻4min，如此反复冻融循环3次；

(4)将步骤(3)处理后的液体移入分液漏斗加入15mL无水乙醇、20mL的石油醚，振蕩1min收集有机层于已称重的三角瓶中，于60℃恒温水浴使有机溶剂挥发45min然后于50℃下真空干燥至恒重，收集孢子油即可；孢子粉破壁率为96.5％孢子油收率为31.3％。

实施例4一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好制备方法包括以下步骤：

(1)取未破壁灵芝孢子粉加入纯化水配成0.1g/mL的悬浊液60mL，然後向悬浊液中加入重量份数为 29％的子实体浸出液萌发22h；

(2)向步骤(1)所得悬浊液中依次加入重量份数为0.4％纤维素酶、0.04％的中性蛋白酶和0.22％的木瓜蛋白酶，震荡摇匀于60℃烘箱中培养0.9h；

(3)将步骤(2)培养后的液体经超声震荡处理35min，使孢子团充分打散于900W下，经超声破碎仪破碎1h然后于－20℃冷冻1.5h，转至微波炉中解冻4min如此反复冻融循环3次；

(4)将步骤(3)处理后的液体移入分液漏斗，加入20mL无水乙醇、30mL的石油醚振荡1min，收集有机层于巳称重的三角瓶中于70℃恒温水浴使有机溶剂挥发45min，然后于50℃下真空干燥至恒重收集孢子油即可；孢子粉破壁率为97.7％，孢子油收率为31.6％

实施例5一种灵芝孢子油和孢子粉哪个好制备方法，包括以下步骤：

(1)取未破壁灵芝孢子粉加入纯化水配成0.1g/mL的悬浊液60mL然后向悬浊液中加入偅量份数为 28％的子实体浸出液，萌发21h；

(2)向步骤(1)所得悬浊液中依次加入重量份数为0.35％纤维素酶、0.03％的中性蛋白酶和0.2％的木瓜蛋白酶震荡摇勻，于60℃烘箱中培养0.8h；

(3)将步骤(2)培养后的液体经超声震荡处理30min使孢子团充分打散，于800W下经超声破碎仪破碎0.8h，然后于－20℃冷冻1.5h转至微波爐中解冻4min，如此反复冻融循环3次；

(4)将步骤(3)处理后的液体移入分液漏斗加入18mL无水乙醇、25mL的石油醚，振荡1min收集有机层于已称重的三角瓶中，于65℃恒温水浴使有机溶剂挥发45min然后于50℃下真空干燥至恒重，收集孢子油即可；孢子粉破壁率为98.1％孢子油收率为32.4％。

应当指出的是具体实施方式只是本发明比较由代表性的例子，显然本发明的技术方案不限于上述实施例还可以有很多变形。本领域的普通技术人员鉯本发明所明确公开的或根据文件的书面描述毫无异议的得到的，均应认为是本专利所要保护的范围