1.本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种富含南瓜多糖的发酵南瓜浆的制备方法，并涉及该富含南瓜多糖的发酵南瓜浆。

2.南瓜多糖是由许多不同类型的糖苷键结合起来的糖链，主要由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成。大量研究表明，南瓜多糖具有抗氧化、降低血糖浓度、抑制瘤体和提高机体免疫力等功能。目前针对南瓜的研究比较多，例如：
3.公开号cna的中国发明《南瓜全浆及制备方法》公开的南瓜制备方法经过南瓜清洗、切段、破碎、煮浆、打浆、除渣、均质等处理，提高了南瓜的使用率，精简了加工步骤，加工成可溶性固形物含量6
15％，不溶性固形物在25
6.8的南瓜全浆。制备方法包括：a、清洗：将南瓜清洗干净；b、切段；c、破碎：破碎加软化水成为南瓜浆；d、煮浆：将南瓜浆加热至95
10min；e、打浆：将软化后的南瓜浆进行打浆细化；f：冷却；g：除渣：将南瓜浆经卧式除渣器处理，去除硬质南瓜子壳；h：均质；i：杀菌；j：罐装储存。本发明最大化利用南瓜，通过双道打浆、除渣、均质工艺，使南瓜全浆进行细化，得到养丰富、色值鲜亮、口感爽滑、风味良好的南瓜全浆产品。
4.公开号：cna的中国发明《植物益生菌发酵南瓜浆的方法》公开了一种植物益生菌发酵南瓜浆的方法，采用两道酶解工艺，一次酶解使用高温淀粉酶，可有效降低南瓜的粘稠度，并提高得浆率到95％左右；二次酶解使用中温淀粉酶和糖化酶，可有效提高南瓜的甜感，再次降低粘稠度，并赋予南瓜较好的香气和细腻半透明状的质感，同时使南瓜的口味更加饱满、香甜。两次酶解完毕，南瓜的可溶性固形物提高1
2个点，从而减少了30％左右的葡萄糖添加量。本发明方法是对南瓜通过酶解工艺和植物益生菌发酵工艺适度减小南瓜原浆的粘稠度，同时产生了如具有保鲜作用的乳酸及其盐类物质，降低了产品的ph，有效的降低了南瓜原浆的杀菌条件，扩展了南瓜制品在食品行业应用的宽度，延长了南瓜制品原料的保质期。
5.公开号cna的中国发明《一种高益生菌含量低糖发酵南瓜粉的制备方法》公开的高益生菌含量低糖发酵南瓜粉的制备方法，通过多种益生菌以及酶解的作用，以凝结芽孢杆菌、乳酸菌及酵母菌为复合发酵菌株，接种至洗净、去籽处理后制备的南瓜浆中，经复合菌株共发酵及酶制剂酶解后得到一种富含活菌的低糖含量南瓜浆(粉)，产品中的糖类可充分被活菌所利用供益生菌生长，最终降低南瓜粉含还原糖量至5％以下，总益生菌数可达106cfu/g至108cfu/g，不仅具有较高的菌数且含糖量低，便于糖尿病患及其他需血糖控制的患者使用。
6.公开号cna的中国发明《一种凝结芽孢杆菌益生菌常温活菌饮料及其制备方法》公开的常温活菌饮料由南瓜浆经果胶酶、纤维素酶和糖化酶酶解后与凝结芽孢杆菌混合发酵并加入调味剂调和而成，所述的南瓜浆由南瓜块原料煮熟后加水打浆而成；其中，每100重量份的南瓜块原料中，加入的果胶酶、纤维素酶、糖化酶和调味剂的重量份数依
7.25份；利用本发明制备方法制备的一种凝结芽孢杆菌益生菌常温活菌饮料，既保持了南瓜本身特有的香气，还具有浓郁的发酵香气，酸甜适中、风味协调，并且含有易于常温保存的益生凝结芽孢杆菌，易于常温保存。
7.超声波复合酶法提取南瓜多糖的方法比较常见，但目前常见提取方法多添加乙醇等有机溶剂，不适宜人们直接食用。本发明提取条件温和，不添加有机溶剂，并且可维持提取后南瓜浆中其他营养成分不被破坏，反应液还可进一步进行益生菌发酵，提高南瓜浆中多糖含量。

8.本发明首先利用超声波辅助复合酶法处理南瓜浆充分释放南瓜多糖，继而添加促进益生菌生产多糖的促生长剂后，通过发酵的方式进一步产出多糖，本发明提出一种新的工艺，新工艺可大幅提高发酵南瓜浆中的多糖含量，该方法制备的发酵南瓜浆中多糖含量较传统发酵方法多糖含量提高近1倍。本发明的目的是提供一种富含南瓜多糖的发酵南瓜浆的制备方法。
9.为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
10.本发明提供了一种富含南瓜多糖的发酵南瓜浆的制备方法，包括以下步骤：
11.1)将南瓜去皮、去籽后，切成均匀薄片烫漂，加入纯净水破碎打浆获得破碎浆体，所述破碎打浆的过程中添加异抗坏血酸钠；
12.2)将步骤1)中所述破碎浆体与有利于南瓜多糖溶出的复合酶混合后，进行超声波协助酶解，获得酶解南瓜浆；所述复合酶包括果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶；所述复合酶的添加质量分别为破碎浆体质量的3
13.3)向步骤2)中所述酶解南瓜浆加入葡萄糖、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、硫酸锰和酵母提取物混匀后均质，上述物质均为益生菌促生长剂；所述各促生长剂的添加质量分别为酶解南瓜浆质量的5％、0.2％、0.28％、0.005％和0.01％；
14.4)灭菌：所述灭菌条件是100～110℃，灭菌时间是5～10min，得灭菌南瓜浆；
15.5)向步骤4)中所述灭菌南瓜浆中接种复合益生菌菌种进行20～28h发酵；所述复合益生菌菌种由植物乳杆菌和嗜热链球菌组成；所述复合益生菌的菌种比例是1：1。
16.优选的，所述异抗坏血酸钠的添加量为南瓜浆质量的2
17.优选的，所述超声波协助酶解依次包括超声波处理过程和酶解过程；所述超声波处理过程的时间为10～15min，所述超声波处理的超声强度为4～5w/ml。
18.优选的，所述酶解过程的温度为50～55℃，所述酶解过程的时间为40～100min。
19.优选的，所述复合酶中的果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶的独立酶活为15～25万u/g。
20.优选的，步骤5)中所述复合益生菌的接种浓度为107～108cfu/ml，接种量为南瓜浆质量的6％～8％。
21.优选的，步骤5)中当发酵料液的ph值为3.5～4.0时，结束发酵。
22.本发明同时提供所述的制备方法制备获得的富含南瓜多糖的发酵南瓜浆。
24.本发明提供了一种富含南瓜多糖的发酵南瓜浆的制备方法。采用超声波复合酶法对南瓜多糖进行释放，通过加入有利于南瓜多糖溶出的复合酶酶解后，继而进行超声波协助酶解，经超声波空化效应，使南瓜多糖充分溶解、释放，提高南瓜多糖得率，尽量提高原材料的多糖含量；然后采用发酵的方式，同时添加复合益生菌促生长剂，更有利于复合益生菌在南瓜浆中的生长，通过发酵，进一步释放、产生南瓜多糖，同时还能够产生短链脂肪酸、多肽等益生菌代谢产物，使南瓜浆产品营养全面均衡。通过反复实验验证，添加磷酸氢二钾、硫酸锰等作为促生长剂可提高益生菌在南瓜浆中生长繁殖的能力，利用益生菌的发酵产生更多的多糖类物质，提高南瓜浆多糖含量，使产品中多糖含量能够达到156.43mg/l以上。采用这两种工艺方法相结合最终提高南瓜浆中南瓜多糖含量，生产出一种富含南瓜多糖的益生菌发酵南瓜浆饮品，同时南瓜浆中短链脂肪酸、多肽等益生菌代谢产物的产生，使得南瓜浆产品营养更全面更均衡。
25.本发明工艺技术简单，原料丰富易得，适于实施和推广。
26.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
27.本发明各实施例所采用的乳酸菌来自工业微生物菌种保藏管理中心(cicc)，菌种为：植物乳杆菌植物亚种(cicc21824)，嗜热链球菌(cicc20373)，是经过菌株筛选后适宜南瓜浆发酵的优势菌株。
28.果胶酶、纤维素酶购自宁夏和氏璧生物技术有限公司，木瓜蛋白酶购自南宁庞博生物工程有限公司。
29.下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
31.一种富含南瓜多糖的发酵南瓜浆的制备方法，步骤如下：
32.1)切片烫漂：将新鲜无腐烂的南瓜，流动清水冲洗2～3次后，去籽、去皮，切成5mm的均匀薄片后，置于沸水中烫漂5min；
33.2)破碎打浆：在烫漂后的南瓜片中加入等体积纯净水，添加总体积2
的异抗坏血酸钠，打浆，制成南瓜浆；
34.3)超声波协同酶处理：向南瓜浆中加入酶解能力强，有利于南瓜多糖溶出的复合酶制剂，将南瓜浆置于超声波破碎机内超声10min，超声结束后，继续在55℃下水浴振荡酶解80min。所述复合酶包括果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶，所述复合酶中各酶的添加质量分别为破碎浆体质量的3
，所述超声强度为4w/ml；
35.所述复合酶中的果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶的独立酶活分别为25万u/g，15万u/g，10万u/g；
36.4)添加益生菌促生长剂：向上述酶解南瓜浆中加入葡萄糖、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、硫酸锰和酵母提取物，添加质量分别为酶解南瓜浆体质量的5％、0.2％、0.28％、
37.5)均质：将添加益生菌促生长剂的南瓜浆均质，均质压力为20mpa，均质温度为45℃；
38.6)灭菌：将均质后的南瓜浆灭菌，灭菌温度为100℃，灭菌时间为10min；
39.7)接种：南瓜浆灭菌后快速冷却至34℃，将复合益生菌菌剂按108cfu/ml接种于南瓜浆中，接种量为8％，34℃发酵20h，当发酵ph值为4.0时结束发酵；
40.所述复合益生菌由植物乳杆菌和嗜热链球菌组成；菌种比例为1∶1；
41.8)按以上方法制备得到的发酵南瓜浆，经检测，南瓜多糖含量为156.43mg/l。
43.一种富含南瓜多糖的发酵南瓜浆的制备方法，步骤如下：
44.1)切片烫漂：将新鲜无腐烂南瓜，流动清水冲洗2～3次后，去籽、去皮，切成5mm的均匀薄片后，置于沸水中烫漂4min；
45.2)破碎打浆：在烫漂后的南瓜片中加入等体积纯净水，添加总体积4
的异抗坏血酸钠，打浆，制成南瓜浆；
46.3)超声波协同酶处理：向南瓜浆中加入酶解能力强，有利于南瓜多糖溶出的复合酶制剂，将南瓜浆置于超声波破碎机内超声15min，超声结束后，继续在50℃下水浴振荡酶解100min。所述复合酶包括果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶，所述复合酶各酶的添加质量为破碎浆体质量的3
，所述超声强度为4.5w/ml；
47.所述复合酶中的果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶的独立酶活分别为20万u/g，25万u/g，15万u/g；
48.4)添加益生菌促生长剂：向上述酶解南瓜浆中加入葡萄糖、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、硫酸锰和酵母提取物剂，添加质量分别为酶解南瓜浆体质量的5％、0.2％、0.28％、0.005％和0.01％；
49.5)均质：将添加益生菌促生长剂的南瓜浆均质，均质压力为25mpa，均质温度为40℃；
50.6)灭菌：将均质后的南瓜浆灭菌，灭菌温度为105℃，灭菌时间为6min；
51.7)接种：南瓜浆灭菌后快速冷却至30℃，将复合益生菌菌剂按107cfu/ml接种于南瓜浆中，接种量为8％，34℃发酵24h，当发酵ph值为4.0时结束发酵；
52.所述复合益生菌由植物乳杆菌和嗜热链球菌组成；菌种比例为1∶1。
53.8)按以上方法制备得到的发酵南瓜浆，经检测，南瓜多糖含量为158.56mg/l。
55.一种富含南瓜多糖的发酵南瓜浆的制备方法，步骤如下：
56.1)切片烫漂：将新鲜无腐烂南瓜，流动清水冲洗2～3次后，去籽、去皮，切成5mm的均匀薄片后，置于沸水中烫漂5min；
57.2)破碎打浆：在烫漂后的南瓜片中加入等体积纯净水，添加总体积4
的异抗坏血酸钠，打浆，制成南瓜浆；
58.3)超声波协同酶处理：向南瓜浆中加入酶解能力强，有利于南瓜多糖溶出的复合酶制剂，将南瓜浆置于超声波破碎机内超声12min，超声结束后，继续在55℃下水浴振荡酶解40min。所述复合酶包括果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶，所述复合酶各酶的添加质量分
，所述超声强度为5w/ml；
59.所述复合酶中的果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶的独立酶活分别为10万u/g，15万u/g，10万u/g；
60.4)添加益生菌促生长剂：向上述酶解南瓜浆中加入葡萄糖、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、硫酸锰和酵母提取物，添加质量分别为酶解南瓜浆体质量的5％、0.2％、0.28％、0.005％和0.01％；
61.5)均质：将添加益生菌促生长剂的南瓜浆均质，均质压力为22mpa，均质温度为43℃；
62.6)灭菌：将均质后的南瓜浆灭菌，灭菌温度为103℃，灭菌时间为8min；
63.7)接种：南瓜浆灭菌后快速冷却至32℃，将复合益生菌菌剂按108cfu/ml接种于南瓜浆中，接种量为6％，32℃发酵20h，当发酵ph值为3.8时结束发酵；
64.所述复合益生菌由植物乳杆菌和嗜热链球菌组成；菌种比例为1∶1；
65.8)按以上方法制备得到的发酵南瓜浆，经检测，南瓜多糖含量为160.23mg/l。
67.设置对照例，来说明不同的制备方法对南瓜浆中多糖含量的影响。对照例1：该对照例1与实施例1～实施例3不同之处在于：不对南瓜浆进行超声波辅助果胶酶
木瓜蛋白酶复合酶处理，其他工艺步骤与本发明相同。最终发酵所得南瓜浆中南瓜多糖含量为104.78mg/l。对照例2：该对照例与实施例1～实施例3不同之处在于：不在南瓜浆中添加益生菌促生长剂葡萄糖、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、硫酸锰和酵母提取物，其他工艺步骤与本发明相同。最终发酵所得南瓜浆中南瓜多糖含量为112.42mg/l。对照例3：该对照例与实施例1～实施例3不同之处在于：1、不对南瓜浆进行超声波辅助果胶酶
木瓜蛋白酶复合酶处理；2、不在南瓜浆中添加益生菌促生长剂葡萄糖、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、硫酸锰和酵母提取物，其他工艺步骤与本发明相同。最终发酵所得南瓜浆中南瓜多糖含量为81.62mg/l。
68.南瓜多糖的测定采用如下方法：
70.利用水提醇沉法提取总多糖，苯酚
硫酸法测定总多糖含量。
73.分别吸取本发明及各对照例南瓜浆5ml，加入1ml去离子水，充分匀浆。100℃水浴提取2h(必须盖紧盖子防止水分流失)，冷却后10000g离心10min，取上清。吸取0.2ml上清，慢慢加入0.8ml无水乙醇，混匀后4℃静置过夜，10000g离心10min，弃上清，沉淀中加入1ml水，充分混匀溶解沉淀。
75.调节酶标仪波长至490nm。吸取处理液的上清液200μl，加入100μl试剂一和0.5ml浓硫酸，混匀后90℃水浴20min，流水冷却。取200μl上清液加入酶标板，于490nm下测定吸光值a。
77.以葡萄糖作为对照品，标准条件下测定回归方程为y＝7.981x
80.v1：醇沉后重新溶解后的体积，1ml；v2：进行醇沉的体积，0.2ml；v3，提取时加入水的体积，1ml；w：样本质量，g；1000，mg到μg的换算系数。
81.5.测定数据如下表所示：
82.同样的南瓜样品采取不同工艺生产出的发酵南瓜浆南瓜多糖含量对比表如下：
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解；其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

yahoo.list()    //得到邮件列表, 返回一个元组的列表, 元组中, 第一个元素是服务器返回消息, 第二个元素是消息的列表, 第三个元素是返回信息的大小.

1 多线程编程的适合场景: 本质上就是异步的, 需要有多个并发事务, 各个事务的运行顺序可以是不确定的, 随机的, 不可预测的.  这种编程任务可以被分成多个执行流, 每个流都有一个要完成的目标, 根据应用的不同, 这些子任务可能都要计算一个中间结果, 用于合并得到最后的结果.

1.1 运算密集型的任务一般都比较容易分隔出多个子任务, 顺序或异步执行.

1.2 多个外部输入源的任务使用单线程方式很难解决(可能得需要使用计时器方式实现.)

1.3 顺序执行的程序必须使用非阻塞I/O或是带有计时器的阻塞I/O, 因为用户的如入到达是不确定的.

2 使用多线程编程和一个共享的数据结构如Queue, 这种程序任务可以用几个功能单一的线程来组织:

2.1 UserRequestThread: 负责读取客户的输入, 可能是一个IO信道.  程序可能创建多个线程, 每个客户一个, 请求会被放入到队列中

2.2 RequestProcessor: 一个负责从队列中获取并处理请求的线程, 会为下面那种线程提供输出

2.3 ReplyThread: 负责把给用户的输出取出来, 如果是网络应用程序就把结果发送出去, 否则就保存到本地文件系统或数据库中.

3 进程: 有时被称为重量级进程, 是程序的一次执行.  每个进程都有自己的地址空间, 内存, 数据栈和其他记录其运行轨迹的辅助数据. 操作系统管理在其上运行的所有进程, 并为这些进程公平的分配时间篇.  进程可以通过fork和spawn操作来完成其他任务.  进程之间的通讯使用IPC.  而不能直接共享信息.

4 线程: 有时被成为轻量级进程.  所有的线程都是运行在同一个进程中, 共享相同的运行环境.

4.1 三种状态: 开始, 顺序执行, 结束

4.2 线程拥有自己的指令指针, 记录自己运行到什么地方. 线程的运行可能被抢占(中断), 或暂时的被挂起(睡眠), 让其他的线程运行, 这也叫做让步.

4.3 一个进程中的多个线程之间共享同一片数据空间, 所以, 线程之间的通讯比进程之间的通讯更加方便.

4.4 线程一般都是并发执行的, 并行和数据共享机制使得多任务合作成为现实

4.5 危险性: 多线程同时访问同一片数据的时候, 可能导致脏读等情况的发生.  这种情况叫做竞态条件, 这种危险的解决使用线程同步.

4.6 另一个危险来源于阻塞: 有的函数会在完成之前阻塞住, 在没有特别为多线程做修改的情况下, 这种”贪婪”的函数会让CPU时间分配有所倾斜, 导致多线程分配到的运行时间不尽相同, 不公平.

5 线程或进程的并行, 实际上都是线性的, CPU分出时间片, 每个进程, 线程会根据优先级等CPU时间片分配策略得到相应的执行时间.